如何用紫外和荧光计算相对量子效率

荧光属于光致发光，需选择合适的激发光波长(Ex)以利于检测。激发波长可通过荧光化合物的激发光谱来确定。激发光谱的具体检测办法是通过扫描激发单色器，使不同波长的入射光激发荧光化合物，产生的荧光通过固定波长的发射单色器，由光检测元件检测。Z终得到荧光强度对激发波长的关系曲线就是激发光谱。在激发光谱曲线的Z大波长处，处于激发态的分子数目Z多，即所吸收的光能量也Z多，能产生Z强的荧光。当考虑灵敏度时，测定应选择Z大激发波长。荧光激发波长对应于某一个紫外可见光谱吸收波长，可能稍大一些，不完全相等。你可以将紫外吸收波长设为激发波长，扫描发射光谱，然后再固定发射波长扫描激发光谱，得到Z大激发波长，再做发射光谱，再做激发光谱，一直到得到固定不变的激发和发射波长为止。 紫外吸收波长可以作为激发波长，激发波长的选择不影响发射波长的选择，理论上激发光谱和发射光谱有一个镜像关系，很多人就误以为，激发波长和发射波长时一一对应的，其实不然，激发光谱的强弱只代表该物质在所选择的激发波长下被激发的比率，其发射光谱还是原来形状的光谱，只是在强弱上改变.我们选择Z大激发波长是为了获得高激发率的物质形态，间接提高灵敏度，选择Z大发射波长是为了直接提高灵敏度