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微量DNA模板加倍扩增方法

ta25764168 2010-01-04
各位,我要构建遗传图谱,但所用材料的DNA模板很少,只有500ng,而构建图谱需要大量DNA模板,听说有一种方法可以进行模板的扩增,使模板加倍。请教各位,能简要提供一些这种方法的信息吗?不胜感激!
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幻雪夜57
首先说哈,我不是做广告的,基因组扩增试剂盒在市场上是存在的,这种试剂盒的原理与RCA差不多,至于RCA的原理请你百度一下,简单来说RCA叫做滚环复制,主要是针对环状DNA的一种复制方法,如果你的基因组是线性的还是推荐使用试剂盒,我用过的是QIAGEN repli_g试剂盒,扩增的模板是动物粪便提取物,电泳检测根本看不到条带,扩增后有50ng/ul的浓度,效果还是不错的,可能出现的问题就是扩增了目的基因的同时也扩增了非目的基因,不过这是目前来说无法避免的,要革命总要有牺牲哈~
5 0 2010-01-06 0条评论 回复
萧擎峰
二次PCR
1 0 2010-01-05 0条评论 回复
asd704616717a
- -
你PCR的时候不就是模板加了N多倍了么。。。。。。
13 0 2010-01-05 0条评论 回复
晧瀚
要构建遗传图谱,貌似是需要基因组DNA吧?如果你是需要基因组DNA,那么,没什么办法来给你加倍模板。
如果你只是一个小于10kb的一个DNA片段,你可以考虑通过PCR增加你的模板量。
15 0 2010-01-05 0条评论 回复
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