内参基因和待测基因本来就不一样。
扩增曲线和溶解曲线不是一个概念。扩增曲线是每扩增一个循环,测量一次荧光强度。这个由底物的浓度和扩增效率所决定。目的基因和内参的浓度肯定不同,而且引物的序列不同,扩增效率也可能不一样,所以两者的曲线肯定有可能不一样。
SyberGreen PCR,溶解曲线是PCR完成以后,对产物逐步加温,测量荧光强度的变化,而不是荧光强度本身。DNA双链在温度达到TM附近时,发生大量的解离,荧光强度的变化Z大,出现峰值。这个峰值的位置是由PCR产物的TM值所决定的,和PCR产物的序列,GC比例有关。所以内参基因和目的基因的峰值肯定是不一样的。