提取的核酸浓度高纯度好，为什么扩增的效果却很差

总的来说包括了核酸的分离、提纯，核酸的扩增，检测，定性与定量分析等。下面以DNA为例说一下相关的概念。

1、DNA的分离提纯就那些试剂，那些步骤，网上一大堆视频的，自己去找吧。

2、扩增一般指的是PCR，需提供引物（引物具有特异性，比如说乙肝病毒基因的引物只能扩增乙肝病毒基因）、酶、底物等，三个流程一个循环：变性、复性、延长。

3、检测一般有紫外分光光度法，电泳分析，杂交分析。

（1）紫外分光光度法：此法的原理涉及到一些光学的知识，可以查询相关书籍以能更好的理解，可以做定量分析，分为单组份分析和多组分分析。

单组份分析有：

1）标准曲线法：用不通浓度的标准溶液，同一条件下测定吸光度A，以吸光度A为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，根据测得的待测样品吸光度，从标准曲线中便可知溶液浓度。

2）标准对照法：标准溶液浓度a，吸光度A，待测样品吸光度B，则根据朗-比定律有待测样品浓度为：B*a/A。

3）吸光系数法：吸光系数K，测得待测样品吸光度A，溶液的厚度d，根据朗-比定律，则待测样品的浓度为：A/(K*d)。

多组分分析没研究过了，自己查查相关资料吧。

（2）电泳分析是根据DNA的分子量和结构不同而在电场中的移动速度不同的原理，电泳的时候需要加MARKER或者已知的基因的片段进行测量。说说MARKER的概念吧，MARKER是由一些列一定梯度的基因片段组成的基因混合物，梯度一般有100bp，200bp，500bp等，MARKER电泳过后便形成很多条距离相等的条带，每两条条带之间的距离为前面提到的梯度值，MARKER用来做标准参考，具有标尺的作用