发光是因为用了发光物质标记的。
利用液氮对组织进行研磨,从而破碎细胞。细胞提取液中含有的SDS 溶解膜蛋白而破坏细胞膜,使蛋白质变性而沉淀下来。EDTA YZDNA 酶的活性。再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白,得到的DNA 溶液经乙醇沉淀。
取4g 新鲜叶片,在液氮中研磨成粉末状(越细越好)。
2. 转移至50 mL 离心管中,加人16 mL 细胞提取液,充分混匀。65
℃水浴保温20 min 。
3. 从水浴中取出离心管,加人5 mL 5 mol/L KCl 溶液,混匀,冰浴20
min 。
4. 4 000 r/min 离心20 min 。
5. 将上清液转移到另一50 mL 离心管中。
6. 加等体积酚/氯仿混匀,12 OO0 r/min 离心5 min ,取上清。
7. 加等体积氯仿,混匀,12 000r / min ,离心5 min ,取上清。
8. 加人0.6 - 1 倍体积的异丙醇(沉淀DNA ) ,混匀。
9. 离心获得沉淀,70 %乙醇洗3 次。风干沉淀。
10. 加人500 μL TE 缓冲液,溶解DNA 。
11. 取3μL 上清液,琼脂糖凝胶电泳检测DNA 浓度、质量。
Z后用EB跑电泳就可以看到你在电视上看到的发光的dna了