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DNA提取是为什么要加入两倍体积无水乙醇?

哈尔滨生殖保健 2015-03-17
说是沉淀DNA,但是沉淀原理是什么,而且为什么是两倍体积
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CH68453622
  用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中Z常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。
  DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。
  一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的Z终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。但是加95%的乙醇使总体积增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大,尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵,Z后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。
13 0 2017-09-20 0条评论 回复
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