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- 挽歌捚嬐 2013-07-04 00:00:00
- 荧光分析法 荧光分析法 附录Ⅳ E. 荧光分析法 某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波长较长的荧光。物质的 激发光谱和荧光发射光谱,可以用作该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所用溶 剂及温度等条件固定时,物质在一定浓度范围内,其发射光强度与溶液中该物质的浓度 成正比关系,可以用作定量分析。荧光分析法的灵敏度一般较紫外分光光度法或比色法 为高,浓度太大的溶液会有“自熄灭”作用,以及由于在液面附近溶液会吸收激发光, 使发射光强度下降,导致发射光强度与浓度不成正比,故荧光分析法应在低浓度溶液中 进行。 所用的仪器为荧光计或荧光分光光度计,按各药品项下的规定,选定激发光波长和 发射光波长,并配制对照品溶液和供试品溶液。 由于不易测定荧光强度,故荧光分析法都是在一定条件下,用对照品溶液测定 荧光强度与浓度的线性范围后,再在每次测定前,用一定浓度的对照品溶液校定仪器的 灵敏度;然后在相同的条件下,分别读取对照品溶液及其试剂空白的荧光读数与供试品 溶液及其试剂空白的荧光读数,用下式计算供试品浓度: R<[i]>-R<[ib]> C<[i]>=×C<[r]> R<[r]>-R<[rb]> 式中 C<[i]>为供试品溶液的浓度; C<[r]>为对照品溶液的浓度; R<[i]>为供试品溶液的荧光读数; R<[ib]>为供试品溶液试剂空白的荧光读数; R<[r]>为对照品溶液的荧光读数; R<[rb]>为对照品溶液试剂空白的荧光读数。 因荧光分析法中的浓度与读数的线性较窄,故(R<[i]>-R<[ib]>)/(R<[r]>-R<[rb ]>)应为0.50~2.0;如有超过,应在调节溶液浓度后再测。 对易被光分解的品种,为使仪器灵敏度定标准确,避免因激发光多次照射而影响荧 光强度,可选择一种激发光和发射光波长与之近似而对光稳定的物质配成适当浓度的溶 液,作为基准溶液,例如蓝色荧光可用硫酸奎宁的稀硫酸溶液,黄绿色荧光可用荧光素 钠水溶液,红色荧光可用罗丹明B水溶液等,在测定供试品溶液时用基准溶液代替对照品 溶液校定仪器的灵敏度。 荧光分析法因灵敏度高,故干扰因素也多。溶剂不纯会带入较大误差,应先作空白 检查,必要时,应用玻璃磨口蒸馏器蒸馏后再用。溶液中的悬浮物对光有散射作用,必 要时,应用垂熔玻璃滤器滤过或用离心法除去。所用的玻璃仪器与测定池等也必须保持 高度洁净。温度对荧光强度有较大的影响,测定时应控制温度一致。溶液中的溶氧有降 低荧光作用,必要时可在测定前通入惰性气体除氧。
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- 恒电位库仑分析法
一、方法与装置
恒电位库仑分析法是在电解过程中控制工作电极电位相对于参比电极保持不变,并只有被测物质在电极上发生反应,当电解电流趋于零时,表示该物质已被完全电解,测量电解过程中消耗的电量,再按法拉第电解定律计算被测物质的含量。
恒电位库仑分析的仪器装置基本上和控制阴极电位电解法相似,只是在电解电路中串接一个库仑计,以测量电量。
二、电量的测量
通常使用化学库仑计、电子积分仪等测量电量。
1)化学库仑计 它利用通过与某一个标准的化学过程相比较而进行测定。库仑计本身是一个电解池,串联入电路时与试样电解同时进行,通过库仑计中反应物的相当量,计算得到电解时的总电量。化学库仑计有重量式、体积式、比色式、滴定式等类型。其中气体库仑计(如氢氧库仑计、氢氮库仑计)及库仑式库仑计使用方便而被广泛使用。
气体库仑计能测量10库仑以上的电量,准确度达到?.1%,但灵敏度差。
库仑式库仑计适用于微量物质测定,其电量可测至低达0.015库仑,准确较高,相对误差不大于士0.1%。
2)电子积分仪 根据电解通过的电流,采用电子积分线路求得总电量。并由显示装置读出,也可以将电流,经模/数转换后输入微机,进行积分处理求得电量。此法近年来发展迅速,适用范围广,精度高,可用于自动分析。
三、应用
控制电位库仑分析法是在控制工作电极电位情况下进行测定的,它具有很好的选择性,而且准确、灵敏,适用于混合物质的分析,以及多种氧化态混合物的分析。在无机物方面可用于约几十种的元素测定,见表2.44,包括非金属氢、氧、卤素等,金属锂、钠、铜、金、银、铂族,稀土元素、镅、锫、锎,以及放射性元素铀、钚的分析应用。
控制电位库仑法也应用于有机物的分析。
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