GX液相色谱实验，如何确定及优化色谱条件

这个问题很大，不是一句两句就能解决的，因为一个方法的开发与优化是个系统性的工作，应该不断的尝试与改进。
就一般情况来说，你想确定合适的液相分析方法，应该首先搞清楚你检测的物质中都含哪些物质，根据它们的分子式及结构物性，物理化学性质来选择合适的分析条件。比如是否怕水，有无紫外吸收，分子量大小，极性大小，酸碱性等因素。从这些情况来判断你液相检测的可能条件。
然后，基本以上情况你分别判断出流动相的PKA（酸碱性），确定了流动相的PH（不确定就选中性），波长，色谱柱，流速，柱温。一般情况下你可以选择，乙腈：水，C18柱，25度柱温，1ml/min流速，以乙腈：水=90：10运行一针，看出峰情况，主要看Z后一个峰是几分钟出来，然后再调整流动相比例，优化成所有的峰都能冲洗出来，还能进行分离，同时进行波长扫描，确定合适波长，等等。
Z后跟据内、外标或归一化调整流动相等达到省时，快速检测、准确等目的。

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　　在GX液相色谱分析中，分离条件的优化是指在选定的色谱柱上（即柱容量恒定条件下）来实现：

（1）在保证一定分离度的条件下，实现分析速度的Z优化。
（2）在保证一定分析时间的条件下，实现难分离物质对分离度的Z优化。
　　在色谱分析中，分离度、分析速度和柱容量三者之间的关系，呈现幻想的三角形，即其中任一因素都要受到另外两个因素的制约，因此至今也未曾找到高分离度、高柱容量和快速分析三者同时存在的色谱分析系统。在任何情况下，色谱分析都只能沿三角形中的一个边，去实现Z佳参数的选择，即越要在一个方向上实现Z佳化，则在另外两个参数上的损失也越大。