溶解、过滤、烘干——为得到足够的盐酸小檗碱作为对照品;2.取1克,精密称定,溶解于50ml溶剂中——得到20mg/ml的盐酸小檗碱对照品溶液;3.分别配成5、10、20、30、40微克/毫升——为了绘制标准曲线配制的5个浓度,Z终的小檗果制成的供试品溶液应该在5-40微克/毫升范围内,Z可能在20微克/毫升附近;4.在346纳米波长处连续测定——346nm是此方法盐酸小檗碱的含量测定波长,很可能是盐酸小檗碱在紫外光区的Z大吸收波长;绘制标准曲线和包括后续的含量测定必须连续测定,避免系统漂移;5.溶剂B的浓度比例为45——我也没明白,是不是上下文有缺失呢?6.小檗果样品在相同条件下测定——小檗果样品即供试品溶液,制备过程没写,应该是配出来了,当然应该在绘制标准曲线时的条件下(346nm)测定了,Z好是连续测定,相隔时间不要太久。7.盐酸甲醇1:100要一次配够,Z终的供试品溶液应该是溶解在盐酸甲醇1:100中的,空白溶液也是盐酸甲醇1:100。老师的目的是让你练习紫外-可见分光光度法,使用标准曲线进行含量测定。如果还不懂,可借阅《ZG品检验标准操作规范》2010年版和《ZG典》2010年版中的紫外-可见分光光度法。
看错了,你标题里提到HPLC法,那溶剂B的浓度比例为45应该是使用双通道,流动相通道A占55%,通道B占45%。由于液相方法应该做方法学验证其回收率和线性,你没有做,所以采用标准曲线法。
如果还不懂请留言