小弟Z近在做一株纯化的肿瘤细胞系的耐药性研究，昨天做流式细胞仪的时候发现我未做任何处理的纯化肿瘤细胞在流式细胞图像上分成了两群，Z简单的解释就是说我的肿瘤细胞里有两种不同... 小弟Z近在做一株纯化的肿瘤细胞系的耐药性研究，昨天做流式细胞仪的时候发现我未做任何处理的纯化肿瘤细胞在流式细胞图像上分成了两群，Z简单的解释就是说我的肿瘤细胞里有两种不同大小和数量细胞，但我冥思苦想都没有发现平时的操作有这样的纰漏可能会混入别的细胞，而且在4个月前测流式细胞时还未曾发现这样的问题。请问各位高手这种情况除了混入细胞还有什么可能性，另外有一个小细节就是我这次培养板的细胞养的比较久，结果细胞长了两层，会不会导致上下层的细胞大小不一样，请帮帮我！十分感谢！
Z好贴个图看看。
我估计是在FSC上看到的大小两群？有时候光凭这个参数来判断大小是不很特异的。建议Gate细胞后（排除了debris后），再gate一下，以SSC-H和SSC-A作为X和Y的指标，正常情况下应该是比较紧密的直线，如果有散点在SSC-A的方向发散，说明有2个细胞聚集了，样本没有充分制备为单细胞悬液。
还有就是药物处理，生长时间长等（处于非指数生长期）有时是会改变细胞形态的，可以导致流式散点图的switch，这个情况也很常见。
免疫检查点抑制剂治 疗后流式细胞仪检测方法的建立
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年少懵懂L 
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