假设被测化合物吸收的(特征)单色光的强度(power)为 Po, 当经过样品池后,有强度为 P 的单色光未被吸收(透射),那么被吸收的强度为 (Po-P). 有:
透光率= P/Po ; 吸光度=-ln透光率=ln(Po/P)
如果单色光不纯,即除了特征单色光(强度=Po),还有非特征光强 Po'(总强度=Po+Po'). 当这种光经过样品池后,有强度为 P+Po' 的光强未被吸收(透射)。 这时有:
透光率= (P+Po')/(Po+Po') ( > 纯单色光透光率= P/Po, 因为 P < Po )
吸光度=-ln透光率=ln{(Po+Po')/(P+Po')} ( < 纯单色光吸光度=ln(Po/P)
所以,单色光不纯,吸光度下降,摩尔吸光系数变小,灵敏度下降。
这时测得的吸收曲线线性关系(比尔定律)不变, 斜率减小。