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核酸吸附为什么酸性吸附碱性洗脱

123789456气 2017-05-16
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幻雪夜57
羟基磷灰石填料广泛用于核酸和蛋白的纯化,酸性和中性蛋白能被填料的钙离子吸附,盐不影响吸附和洗脱,这样的蛋白需要用用低浓度(30-120mM)的pH7.0的磷酸盐缓冲液洗脱。碱性蛋白被磷酸根吸附,盐会影响吸附和洗脱,所以洗脱可以用盐或者高浓度(120-500mM)的pH7.0磷酸盐缓冲液洗脱。:羟基磷灰石因陶瓷化工艺不同分为2种类型:I型和II型,I型对蛋白质具有更大的保留,对普通蛋白质具有更大的动态载量,主要纯化大部分蛋白质(分子量一般在100kd一下);II型由于孔径较I型大,因而对抗体和部分重组疫苗等大分子量蛋白质的动态载量更高,而对HSA几乎无保留,因而更适合于抗体的纯化,同时II型对核酸具有更大的保留,能够分辩单、双链、是否超螺旋等各种高级结构的核酸,因而也适合纯化核酸。
2 0 2017-05-17 0条评论 回复
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