全部评论(0条)
热门问答
- 如何根据蛋白的活性部位选择相应的抗体进行免疫荧光实验
- 根据蛋白与杂蛋白的大小可以选择怎样的方法来分离
- 免疫荧光和流式细胞仪抗体一样吗
- 如何选择适合的流式抗体(五):举例
- 根据功率如何选择断路器
- 小弟遇到了难题,希望大侠们帮忙解答。谢谢! 1.在学校的电路中,已计算出一条线路的总功率(20000w),如何选择断路器呢? 2.一共三层,每层设一个断路器(同型号的),总进线的断路器如何选择? 3.如果需要计算,请详细说明! 附:原线路总断路器为200A... 小弟遇到了难题,希望大侠们帮忙解答。谢谢! 1.在学校的电路中,已计算出一条线路的总功率(20000w),如何选择断路器呢? 2.一共三层,每层设一个断路器(同型号的),总进线的断路器如何选择? 3.如果需要计算,请详细说明! 附:原线路总断路器为200A,六个分断路器各60A,小开关Z大的32A,怎么选的呢?不明白啊! 展开
- 如何根据产品选择硬度计?
- 如何根据荧光基团的发光强度推算蛋白的量
- 细胞免疫荧光:为什么应该在细胞质表达的蛋白
- 根据电机的频率范围如何选择调速器
- 就是变频器的型号... 就是变频器的型号 展开
- 合成多肽制备的抗体与重组蛋白制备的抗体有什么区别
- 怎么选择各公司的流式抗体?
- 准备买流式抗体,发现文献中注明的抗体来自各个公司。。。。。。非常困惑,文献里用BD的表面标记分子,而在标记胞内抗原的时候喜欢用ebioscience的,为什么在使用的时候不用同一公司的抗体呢?这样很麻烦诶。
- 如何根据电流选择电度表计算公式
- 西门子300PLC中如何根据液位变化改变相应泵的频率
- 扫描电镜 抗体 能不能看到蛋白抗原
- 如何根据药物的性质选择合适的滴定分析方法
- 根据下面参数如何选择正确的流量计类型?
- 我这边有量程0~5粘度0.95正常流量在1~2工作温度0~120度 ,请问选用什么流量计合适?转子?涡街?超声波? 另外同样的参数如果在泵的出口选择什么类型合适?
- 如何根据薄层层析选择柱层析的洗脱剂
- 如何根据断路器的合闸电流选择合闸保险
- ibidi应用指南|免疫荧光实验
免疫荧光实验原理
免疫荧光(IF)是使用显微镜深入了解细胞结构和过程的有效方法。此方法可评估特定蛋白质的表达和位置,使得免疫荧光成为科学家解决许多细胞生物学问题不可或缺的工具。
免疫荧光实验基于以下主要步骤:
1.特异性抗体与感兴趣的蛋白质结合。
2.荧光染料与这些免疫复合物偶联,以便使用显微镜观察感兴趣的蛋白质。
内皮细胞中vWF的免疫荧光染色。肌动蛋白用phalloidin染色(绿色),细胞核用DAPI染色(蓝色)。
区分直接和间接免疫荧光。在直接免疫荧光中,一抗直接偶联到荧光团(也称为荧光色素),便于处理和快速可视化。在间接免疫荧光中,使用特异性结合一抗的二级荧光团偶联抗体来可视化感兴趣的结。
尽管di二种方法比直接免疫荧光更耗时,但它有几个显著的优势,比如它通常更便宜,因为二抗可以用于不同的一抗。此外,通过结合多个一抗和特定的二抗(每个抗体都用不同的荧光团标记),可以在单个样品中平行特异地显示多个蛋白质(多色免疫荧光)。
免疫荧光染色:典型的工作流程
每个免疫荧光染色方案由培养、固定、染色、成像四个主要步骤组成,可细分如下:
免疫荧光染色是一种非常敏感的方法,可能需要排除故障《免疫英冠染色故障排除指南》。方案中的微小变化可能会导致不同的结果,而这些结果不再具有可比性。因此,在您的特定方案中精确地保持完全相同的条件是非常重要的(例如,细胞密度、抗体稀释度、培养温度和培养时间)。
免疫荧光实验方案对比
传统染色与ibidi方案染色
当使用任何ibidi解决方案时,ibidi的免疫荧光染色方案比传统方案要简便快速的多。无需在松散的盖玻片上生长细胞,细胞可直接在ibidi玻片上生长和染色。
用于免疫荧光应用的各种ibidi产品
更多ibidi相关产品的免疫荧光实验应用可查阅我们雷萌公众号相关文章!
参考文献
K.G. Zyner, A. Simeone, S.M. Flynn, et al. G-quadruplex DNA structures in human stem cells and differentiation. Nat Commun, 2022, 10.1038/s41467-021-27719-1
C. Xu, et al. NPTX2 promotes colorectal cancer growth and liver metastasis by the activation of the canonical Wnt/beta-catenin pathway via FZD6. Cell Death & Disease, 2019, 10.1038/s41419-019-1467-7
Kobayashi, T., et al. Principles of early human development and germ cell program from conserved model systems. Nature, 2017, 10.1038/nature22812
H. Tada et al. Porphyromonas gingivalis Gingipain-Dependently Enhances IL-33 Production in Human Gingival Epithelial Cells. PloS one, 2016, 10.1371/journal.pone.0152794
Read article
2月突出贡献榜
推荐主页
最新话题
参与评论
登录后参与评论