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给出一种酶,如何设计其纯化方案?

nice梦总 2008-01-21
1、这是哈尔滨工业大学威海校区《生化分离工程》的; 2、酶不知道是胞内产物还是胞外产物; 3、要考虑不同性质的酶; 4、纯化方案从粗分级到细分级应详细说明。
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小啦啦gg
如果是蛋白质酶,可以考虑
1、沉淀,
2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、SDS-PAGE、凝胶分离电泳,HPLC等。
3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。
4、层析:
a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定PH时,各蛋白质的电荷量及性质不同,故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析,含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来。
b.分子筛,又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内,滞留时间长,大分子蛋白质不能时入孔内而径直流出。
5、超速离心:既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白质其密度与形态各不相同而分开。
9 0 2008-01-22 0条评论 回复
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