自身抗体的检测方法有哪些

　　检测自身抗体的方法有多种，包括间接免疫荧光法、颗粒凝集法、酶联免疫吸附试验、放射免疫法、免疫双扩散法、参比对流免疫电泳法、免疫印迹法、免疫斑点法、胶体金标斑点免疫渗滤法以及速率免疫比浊法等，间接免疫荧光法即适用于检测针对原位成分也适用于可溶性成分的抗体，其余各法均适用于针对可溶性成分的抗体，可根据临床需要及医院条件去选用。以下介绍常用的几种。 　　（1）间接免疫荧光法（IIF）这是进行抗核抗体、抗核仁抗体和抗胞浆抗体筛选检测的Z有效方法。在些检测系统中，以组织培养细胞和器官的冷冻片切为反应底物。 　　（2）免疫双扩散法（ID）免疫双扩散法过去称为“Ouchterlony试验”是Z早用于鉴定系统性自身免疫性疾病中自身抗体特异性的检测系统。在这些系统中，琼脂凝胶是血清中抗体扩散从相反方向扩散过来的抗原相遇的介质，在抗原与抗体间形成沉淀线。鉴定抗原抗体系统时需标准参照血清。当二者相同时，两条沉淀线在琼脂凝胶上形成一条连续的沉淀线。免疫扩散中形成的沉淀线可用来鉴定如抗Sm、RNP、SS-B抗体系统及许多前述的可沉淀性抗原抗体系统。 　（3）对流免疫电泳（CIE）对流免疫电泳是免疫扩散的改良试验，采用电泳以加速抗原、抗体彼此向对方移动的速度，从而仅在几小时内便可形成沉淀线，而免疫双扩散法则需1~2天的时间。在CIE中仅能检出与抗原相比为酸性等电点的抗体，但对流免疫电泳很易检出抗DNA、Sm、RNP和SS-B的自身抗体。 　　（4）免疫印迹法免疫印迹法（Westernblotting，WB）已广泛用于测定自身抗体。在免疫印迹法中，将抗原电泳入聚丙烯酰胺凝胶，蛋白在电泳池中移动的速度与其相对分子大小成比例。许多核内、核仁内和胞浆抗原可根据它们在该系统中的相对移动速度进行测定。与已知分子大小蛋白带发生反应的抗体特异性可据此初步作出判断。 　（5）ELISA这一抗体检测系统十分敏感，但却非常依赖于抗原制品的纯度。通常以部分纯化的组织提取物或部分纯化的重组抗原为底物。抗体与这些抗原发生反应后，加入能结合抗体浓度的指示剂。该系统存在两个问题，一个问题是部分纯化组织提取物中含有一种以上的抗原或重组抗原，这些抗原可含有细菌产物（所检测的血清可能含有针对这些细菌产物的抗体）。另一个问题是随着ELISA的敏感性，其特异性随之降低。