有关聚酰胺柱层析的问题，急！

我用聚酰胺柱层析分离糖苷类物质，流动相是不同浓度的乙醇，我要分离的目标物志已经分离出来，但问题是出来的顺序与薄层层析的顺序不同，这是为什么，还有用完后柱子上挂有其他物质，怎样才能洗脱下来，以便再次利用，希望有经验者指点一下，谢谢！