近年来,以微芯片为基础的基因合成技术发生了令人振奋的新发
展
,
基因合成技术具有显著增加产量和降低基因合成成本的潜力,连
同更GX的酶促修复技术和基因组装技术,
这些新技术正推动合成生
物学走向更高水平。
1.
基因合成
(
不确定的地方全部原文标黄
)
传统的寡核苷酸合成是用微升体积的溶液在小柱上进行合成。
化
学物和溶剂过柱后,
逐步诱导核苷酸单体添加,
形成增长的寡核苷酸
链。依据标准的亚磷酰胺化学法,每轮反应包括以下四个步骤:
1).
脱保护;
2).
偶联;
3).
封闭;
4).
氧化。过去几十年,商业上主要用固
相亚磷酰胺化学法合成
DNA
。但由于化学反应效率上的局限,合成
的寡核苷酸长度大部分不能超过
150-200
个碱基。
如果超过这一长度,
每步化学反应的副反应和低效率都会显著影响到序列的完整和产物