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- jy827981568 2015-12-23 00:00:00
- DNA的复制是半不连续复制,一条前导链是连续合成的,而另一条滞后链是先合成不连续的若干冈崎片段,再由链接酶将其连接在一起合成一条完整链。
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- CH68453622 2017-12-15 12:53:28
- DNA的复制事实上是半不连续复制 即只有一条链的合成是连续的 这听起来很神奇 但确实是这样 连续合成的链叫做前导链 另一条链称为后随链 它的合成是不连续的 以它为模板的合成 需要一段一段地进行 所合成的片段叫做冈崎片段 产生这一现象的原因在于 DNA合成酶只能沿5'-3'的方向合成DNA 而DNA本身的两条链又是反向分布的 所以就造成了只有一条链合成可以连续地进行下去(以它为模板的子链生成方向正好是DNA聚合酶可以直接提供的) 而后随链要盘绕成回环 反扭过来 才能合成 再合成起始的时候 DNA聚合酶是需要一段RNA引物的 在原核生物中这一引物是由dnaQ(一种酶)在已解旋的单链5'端合成,真核生物中也有对应的酶 由于后随链的合成不连续 所以每个片段都要有引物 在DNA合成结束的时候 这些引物要被切除 因而留下缺口 这时又要特定的酶去填补缺口(比如 大肠杆菌中的DNA聚合酶I)可是填补序列和周围序列间会有缺刻 也就是说他们交界处的3'-5'磷酸二脂键是断开的 这时需要DNA连接酶发挥作用 将其连好 所以 后随链上的缺刻多 还真够DNA连接酶忙一阵的 前导链上只有一开始有RNA引物 因此 Z后也基本只有这个地方会用到连接酶
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DNA复制机制和共转录R环之间发生冲突时,会导致癌细胞基因组不稳定性,进而影响DNA合成。本文中,我们展示了ATP依赖性染色质重构INO80复合体可以促进R环解析,防止癌细胞中的复制相关的DNA损伤。
我们使用STED超高分辨率显微镜进行测量,INO80和R环之间具有前所未有的精密共定位。
标题图像:INO80(蓝色)和R环(黄色)的3D体表面模型
在我们的实验中,相比共聚焦成像(250 nm),STED能达到大约50 nm的分辨率,这使我们能够有较高的确定性区分真假共定位事件。使用STED可以轻松观察到INO80亚基和R环亚基之间的共定位,而通过共聚焦成像观察到的INO80和R环之间的多个共定位事件,经STED观察是分离的不同亚基。
在所有分析的细胞中,我们发现相比非共定位R环,INO80共定位的R环明显更加紧密、体积和长度也更大。这些数据表明,INO80复合物与细胞核中最 大、最浓缩的R环域相关。
图1:STED解析INO80和R环的相对位置。
阅读完整文章:
Prendergast L., McClurg U.L., Hristova R., Berlinguer-Palmini R., Greener S., Veitch K., Hernandez I., Pasero P., Rico D., Higgins J.M.G., Gospodinov A. & Papamichos-Chronakis M.:
Resolution of R-loops by INO80 promotes DNA replication and maintains cancer cell proliferation and viability
Nature Communications volume 11, Article number: 4534 (2020)
https://doi.org/10.1038/s41467-020-18306-x
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