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请问DNA降解方法
埋骨葬忠魂
2008-10-13
我想把一系列未知的500bp的DNA序列降解300bp以下的序列,请问Z好怎么办?
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一只小鸟5711
酶切
限制性内切酶把大片段切割成小片段
但是不能保证每条链都能被切开
所以要多尝试几种限制性内切酶
或者同时使用几种酶
酶切后在跑琼脂糖确认片段大小
有条件的话上测序仪测序
针对目标片段侧翼序列设计引物
直接跑PCR
得到的全是你要的目标片段
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2008-10-14
0条评论
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我前天订的
关键是用的管和水(是水溶解的吗),一定要小心DNA酶的污染,用的次数比较多的水要重新高压。建议将去离子水分装在ep管里再高压,然后用过以后就扔到,尽量不要多次重复使用。操作的时候也要注意(比如开盖关盖的时候),手套不要碰到瓶口位置。另外保存温度也很重要,Z好在-20度保存,可YZDNA酶的活性。
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2008-10-14
0条评论
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