真菌污染了。
细胞传代操作:
1.紫外线提前20-30min打开;
2.关紫外灯,开灯,通气,点燃酒精灯;
3.检查细胞生长状况;显微镜下观察各浓度下细胞生长状况(数量、形态、透.亮度、贴壁情况);用酒精棉对培养瓶外部进行擦拭.
4.将培养基倒掉,加PBS冲洗一下,如不需传代,加入5ml新鲜培养基即可;
5.传代:加1.5ml 0.1%Trp PBS冲洗一下(快速);
6.加入3滴左右0.1%Trp PBS,37℃1分钟,轻敲瓶壁使大部分细胞脱落,加入3n(n为传代瓶数)ml培养基(DMEM);
7.用吸管轻柔吹打,尽量让细胞均匀分散开来,各取出3ml至新瓶中;
8 .放入CO2培养箱(培养条件5% CO2、饱和湿度、37℃ )