在猪身上采血后,用LPS和Poly(I:C)刺激血液,我想用定量pcr检测两种细胞因子(IL和INF)的表达问题:1.我如何在NCBI找到这两个细胞因子的mRNA序列?具体一点说,谢谢2.想用q-pcr检测m... 在猪身上采血后,用LPS和Poly(I:C)刺激血液,我想用定量pcr检测两种细胞因子(IL和INF)的表达
问题:
1.我如何在NCBI找到这两个细胞因子的mRNA序列?具体一点说,谢谢
2.想用q-pcr检测mRNA的表达 ,设计引物需要跨内含子么?
3.提取总RNA后,需要再提取mRNA么?还是直接用总RNA检测?如果我真的设计了跨内含子的引物,如何保证扩增利用的模板RNA已经是切除了内含子的?
问题比较多,回答的好一定追加分数,决不食言!
搜索猪的细胞因子(IL和INF)的核酸序列,进“all database”,选“nucleotide”进行搜索,可以得到一些序列,点进去找,看有没有细胞因子(IL和INF)的编码序列
设计引物Z好是在目标序列的前后较接近的地方
再提取mRNA会更好