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细菌DNA提取各步骤和目的,能详细的教一下吗

人才啊培 2018-05-01
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潜新儿
TE是用来浮起细菌的。如果是阳性菌的话Z好是用溶菌酶处理一下。
SDS可以让细胞裂解,并与核蛋白结合(当然也包括DNA)。蛋白酶K自然是降解蛋白的。到这一步可以直接用异丙醇沉淀,70%乙醇洗一次(洗去少量的盐分)。凉得差不多再用少量TE溶解就得到DNA了。
当然,在蛋白酶K处理过后,也可以用1.4M NaCl沉淀一下蛋白(DNA在此浓度溶解度增加,而蛋白减小)。或者用酚:氯仿:异戊醇(25::24:1)PH>7.8抽提,去蛋白。其后依旧用异丙醇沉淀,70%乙醇洗。
CTAB/NaCl功能与SDS相当,但一般用于提取植物基因组。
7 0 2018-05-02 0条评论 回复
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