什么是Cell-Based ELISA以及应用

1、Cell-BasedELISA 的优点： Cell-Based ELISA（基于细胞的 ELISA）是一种全新的ELISA 技术，有两个Z突出的优点： 1.1 不需要抽提蛋白、包被微孔板：细胞直接在微孔板里培养，待检测的时候，将细胞固定在微孔板上并 进行通透处理即可。这样就避免了抽提蛋白时，由于客观和主观上引起样品的损失而导致实验结果在一定 程度上偏离了实际情况。同时不用包被微孔板，简化了实验流程，有助于提GX率。科研人员在一个 96 酶联板上，便能检测目标细胞蛋白经刺激或YZ作用后的表现。由于省去抽提蛋白和裂解细胞的步骤，样本的损失也能降到Z低，比起其他普通的 ELISA 测定方法，这项全新的 ELISA 技术能更快速、更方便 地一次检测大量的细胞内蛋白。 1.2 可同时检测两种不同蛋白：封闭后加入两种抗不同蛋白且来源于不同宿主的一抗，然后再加入不同的 二抗，加入两种荧光底物，检测两个波长。同时检测两种蛋白的好处是显而易见的，可以减少工作量，此 外还可以满足一些特殊的实验需要，例如，需要测定某个蛋白的磷酸化比例，就需要测定磷酸化蛋白的数 量和总蛋白的数量，这两个测定在同一次实验进行，有助于消除实验误差，得到更为精确的实验结果。 2、Cell-Based ELISA 的两种技术： 某些公司发展了双通道Cell-Based ELISA 技术； 双通道与单通道Cell-based ELISA 比较： 双通道cell-based ELISA，顾名思义，即一次可以同时检测两种目的蛋白，R&D Systems 提供的 Cell-based ELISA 就是双通道cell-based ELISA，原理略：（需要荧光检测方式和相应仪器）； 单通道cell-based ELISA，即一次只能检测一种目的蛋白，他和普通ELISA 的主要区别在于样品处理过 3、cell-basedELISA 的应用： 该产品，Z多发展起来的是用于检测磷酸化和非磷酸化蛋白的相对含量； 4、有cell-based ELISA 产品的公司：目前，多家elisa 产品提供 提供cellbased elisa 试剂盒，如Rnd systems， raybiotech， ebioscience， millipore 等公司； 5、如何自己进行 cell based elisa 实验？ 事实上，根据单通道的cell based elisa 原理，可以自己建立cell based elisa 实验系统； 细胞加入培养板中； 加入刺激物或者YZ剂进行培养； 对细胞进行固定或者封闭； 加入diyi抗体； 加入HRP 结合的二抗（二抗的选择，同western blot）； 加入底物进行显色；