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RFLP和DGGE各自的优缺点?谢谢了,大神帮忙啊

ma492179069 2014-06-23
土壤微生物的分子生物学研究,可以有很多方法。我利用RFLP来做,是因为实验室缺少做DGGE的仪器。那么请问,RFLP还具有DGGE所没有的其他优势吗?... 土壤微生物的分子生物学研究, 可以有很多方法。 我利用RFLP来做,是因为实验室缺少做DGGE的仪器。 那么请问,RFLP还具有DGGE所没有的其他优势吗?
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lqqqianqi
RFLP标记是发展Z早的DNA标记技术。RFLP是指基因型之间限制性片段长度的差异,这种差异是由限制性酶切位点上碱基的插入、缺失、失重排或点突变所引起的。 RFLP技术主要包括以下基本步骤: DNA提取→用限制性内切酶酶切DNA→用凝胶电泳分开DNA片段→把DNA片段转移到滤膜上→利用放射性标记的探针杂交显示特定的DNA片段(Southern杂交)和结果分析。 RFLP遍布整个基因组,并且非常稳定,但RFLP实验操作繁琐,检测周期长,成本高昂,不适于大规模的分子育种,在植物分子标记辅助育种中需要将RFLP转换成以PCR为基础的标记。 RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphisma,限制性内切酶片段长度多态性)作为diyi代分子生物学标记自问世以来已广泛运用于多门生物学科研究中,但它运用于植物抗性研究还只是近几年的事。RFLP能对植物的抗性基因进行定位和分离,利用RFLP技术,对于核基因组或叶绿体基因组、尤其是后者,若能提取纯净DNA,则可直接从酶切后的电泳图谱看出其多态性,利用这一方法可以测定种群内、种群间不同水平的物种在污染环境下抗性分化进化水平上的差异。 与核酸序列分析相比,RFLP可省去序列分析中许多非常繁琐工序,但相对RAPD 而言,RFLP方法更费时、费力,需要进行DNA多种酶切、转膜以及探针的制备等多个步骤,仅对基因组单拷贝序列进行鉴定。但RFLP又有比RAPD优越之处, 它可以用来测定多态性是由父本还是母本产生的,也可用来测定由多态性产生的突变类型究竟是由碱基突变或倒位、 还是由缺失、插入造成的。
4 0 2014-06-24 0条评论 回复
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