从链霉菌中分离某种基因的方法 步骤

首先你要知道这个基因的背景，如果这是个已知的基因，那么你需要调去这个基因的全编码序列，然后根据这个编码序列设计PCR引物，上游引物中应含有完整开放可读框的启动子，下游引物因含有完整开放可读框的终止子。接着，你需要提取链霉菌的基因组DNA，接着用基因组DNA作为模板，用之前设计的引物进行PCR扩增。当然，如果你这是个未知的基因，那么你需要纯化获得目标基因的蛋白质产物，然后进行蛋白质的肽链测序，N端测十个左右氨基酸残基，C端测十个左右氨基酸残基，然后去查相应的密码子编码表，接着设计不同的引物，再利用基因组DNA作为模板去扩增。这个方法其实现在已经基本不用了，现在的基因序列数据库是很强大的。而且链霉菌也已经完成了基因组测序，一般直接在NCBI上blast就能拿到目标基因的序列了，所以diyi种方法就OK。