采用稀释平板法分离微生物的过程中，应该注意哪些问题?

1.全过程要在无菌条件下进行
2.接种环使用前在酒精灯上灼烧至红热
3.蘸取少量菌液，先在培养皿上划一条，不要转动接种环

涂布平板操作的步骤: ①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中. ②取少量菌液，滴加到培养基表面. ③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却 8～10s. ④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面.

灭菌后，培养基冷却到 55℃后应及时进行倒平板操作.如果不能及时操作，需要将培 养基放到 55℃左右的电热箱中保温，以防止琼脂凝固

实验后，所有用过的培养基，培养液等都需要统一进行高压蒸汽灭菌后再丢弃，否则 将会造成环境污染