涂板进行鸡回肠细菌计数，为什么大部分板上没有菌生长？

检测大肠杆菌、乳杆菌、需氧菌总数和厌氧菌总数，只有大肠杆菌的部分板有菌落，营养琼脂和厌氧有菌落的更少，乳杆菌干脆就全都没有。样品倍比稀释，每个板50ul，用涂布器涂板（有三个... 检测大肠杆菌、乳杆菌、需氧菌总数和厌氧菌总数，只有大肠杆菌的部分板有菌落，营养琼脂和厌氧有菌落的更少，乳杆菌干脆就全都没有。样品倍比稀释，每个板50ul，用涂布器涂板（有三个涂布器轮流使用好让它们充分冷却），中间也没有误开过紫外。之前做的盲肠的就蛮好的，但是如果是样品有问题的话为什么有的板会有菌落呢，问题到底出在哪里？ 另外还有几个问题：涂板的时候是把液体涂干好呢还是让培养基表面有液体好？ 菌落有大有小，数菌落的时候有该怎么算呢？ 伊红美蓝培养基上什么样的是大肠杆菌的菌落？ 问题有点多，所剩的分数不太够，大家多包涵。 应该不是稀释度的问题，从-3到-6都做了