求助：蛋白酶酶活的测定方法

酶活测定方法 还原法
酶与底物在特定的条件下反应，酶可以促使底物释放出还原性的基团。在此反应体系中添加化学试剂 ，酶促反应的产物可与该化学试剂发生反应，生成有色物质。通过在特定的波长下 比色 ，即可求 出还原产物的含量 ，从而计算出酶活力的大小 。
色原底物法
通过底物与特定的可溶性生色基团物质结合，合成人工底物。该底物与酶发生反应后 ，生色基团可被释放出来 ，用分光光度法即可测定颜色的深浅，在与已知标准酶所做的曲线比较后 ，即可求出待测酶的活力。 粘度法
该法常用于测定纤维素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶 的活力。木聚糖和β-葡聚糖溶液通常情况下可形成极高的粘度，当酶作用于粘性底物时木聚糖和β-葡聚糖会被切割成较小的分子使其粘度大 为降低。基 于Poiseuille定律我们知道 ，只要测定一定条件下溶剂和样品溶液的运动粘度，便可计算特性粘数，并以此来判断酶的活力。
高压液相色谱法
酶与其底物在特定的条件下充分反应后 ，在一定的色谱条件下从反应体系中提取溶液进行色谱分析，认真记录保留时间和色谱图，测量各个样的峰高和半峰高，计算出酶促反应生成物的含量 ，从而换算出酶活力的数值。
免疫学方法
常用 于酶活性分析的免疫学方法包括:免疫电泳法 、免疫凝胶扩散法。这两种方法都是根据酶与其抗体之间可发生特定的沉淀反应 ，通过待测酶和标准酶的比较，Z终确定酶活力。免疫学方法检侧度非常灵敏，可检侧出经过极度稀释后样品中的酶蛋白，但其缺点是不同厂家生产的酶产品需要有不同特定的抗体发生反应。
琼脂凝胶扩散法
将酶作用的底物与琼脂混合熔融后 ，倒入培养皿中或载波片上制成琼脂平板。用打孔器在琼脂平面上打出一个约4-5mm半径 的小孔。在点加酶样并培养24h以后 ，用染色剂显色或用展开剂展开显出水解区，利用水解直径和酶活力关系测定酶活力。