如何检测生物组织中的糖类，脂肪，和蛋白质

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  改挂科成绩mi 2016-02-26 00:00:00

  原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。糖类中的还原糖（如葡萄糖、果糖），与斐林试剂发生作用，可以生成砖红色沉淀。脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可以产生紫色反应。淀粉遇碘变蓝色。因此，可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应，检测生物组织中糖类、脂肪或蛋白质的存在。 操作指南 1．材料　苹果或梨匀浆，马铃薯匀浆，花生种子（实验前浸泡3～4 h）及其匀浆，鸡蛋清（稀释10倍后使用），鲜肝提取液，质量分数为1%的葡萄糖溶液，食用油，豆浆，质量分数为1%的淀粉溶液。 2．用具　双面刀片，毛笔，培养皿，载玻片，盖玻片，显微镜，吸水纸，滴管，试管，试管架，试管夹，大、小烧杯，小量筒，三脚架，石棉网，火柴。 3．试剂 （1）斐林试剂甲液：质量浓度为0．1 g/mL的NaOH溶液。乙液：质量浓度为0．05 g/mL的CuSO4溶液。 （2）苏丹Ⅲ染液称取0．1 g苏丹Ⅲ干粉，溶于100 mL体积分数为95%的酒精溶液中，待全部溶解后使用。 苏丹Ⅳ染液称取0．1 g苏丹Ⅳ干粉，溶于50 mL丙酮中，再加入体积分数为70%的酒精溶液50 mL，充分混合后即可使用。 （3）双缩脲试剂A液：质量浓度为0．1 g/mL的NaOH溶液（10 g NaOH加水至100 mL）。B液：质量浓度为0．01 g/mL的CuSO4溶液（1 g CuSO4加水至100 mL）。 （4）此外还有碘液，体积分数为50%的酒精溶液，蒸馏水。 4．操作要点 （1）观察并记录各种试剂与相关物质反应产生的实验现象，具体操作参见步骤（3）～（7）。 化合物 化学试剂 实验现象 2 mL葡萄糖溶液 1 mL斐林试剂，加热 2 mL食用油 3滴苏丹Ⅲ染液 2 mL豆浆 1 mL双缩脲试剂A液，摇匀； 4滴双缩脲试剂B液，摇匀 2 mL淀粉溶液 2滴碘液 （2）分组预测并用化学试剂实测各种生物组织中可能含有的物质种类，具体操作参见步骤（3）～（7）。 （3）还原糖的检测和观察 ①向试管内注入2 mL待测组织样液。 ②向试管内注入1 mL斐林试剂（甲乙液等量混合均匀后再注入）。 ③将试管放入盛有50～65 °C温水的大烧杯中加热约2 min。 ④观察实验现象。如果待测组织样液中还原糖含量较高，可见溶液的变化为：浅蓝色→绿色→棕黄色→砖红色沉淀。 （4）脂肪的检测和观察（一） 向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液，观察不同生物组织样液被染色的情况。 （5）脂肪的检测和观察（二） 制作花生子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞的着色情况。 ①取材取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮。 ②切片用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片，放入盛有清水的培养皿中待用。 ③制片 选材：从培养皿中选取Z薄的切片，用毛笔蘸取放在载玻片ZY。 染色：在花生子叶薄片上滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3 min（如果用苏丹Ⅳ染液，染色1 min）。 清洗：用吸水纸吸去染液，再滴加1～2滴体积分数为50%的酒精溶液，洗去浮色。 盖片：用吸水纸吸去薄片周围的酒精，滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片。 ④观察在低倍镜下寻找花生子叶薄片的Z薄处，移到视野ZY，将影像调节清楚后换高倍镜观察。在视野中可以清晰地看到被染成橘黄色的脂肪颗粒。 （6）蛋白质的检测和观察 ①向试管内注入待测组织样液2 mL。 ②向试管内注入双缩脲试剂A液1 mL，摇匀；再注入双缩脲试剂B液4滴，摇匀。 ③观察实验现象。如果待测组织样液中蛋白质含量较高，可以观察到待测组织样液变成紫色。 （7）淀粉的检测和观察 ①向试管内注入2 mL待测组织样液。 ②向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。

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