植物色素的提取能用Arnon方法吗？

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  為你R淪落 2008-08-26 00:00:00

  能

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  pabu11 2017-09-06 00:00:00

  Arnon是传统的叶绿素测定方法，是将材料在80%丙酮溶液中研磨并经过滤或离心除去残渣后，测定提取液的光密度值来计算叶绿素含量，所以是使用分光光度计测量光的吸收值继而估算出色素的含量。二甲基亚砜(DMSO)直接浸提高等植物叶绿素，同样是测定提取液的光密度值来计算叶绿素含量，但步骤较为简省，但是对实验条件的控制要求较严格。呵呵！以下是大体的步骤：叶绿素的分子结构是由四个吡咯环组成的一个卟啉环，此外还有一个叶绿醇的侧键，由于分子具有共轭结构，因此可吸收光能。叶绿素是脂类化合物，所以它可溶于丙酮、石油醚、己烷等有机溶剂，用有机溶剂提取的叶绿素可在一定波长下测定叶绿素溶液的消光值，利用Arnon公式计算叶绿素含量。 二、材料、仪器与试剂 1．材料：菠菜叶片 2．仪器：分光光度计、天平、具塞刻度试管（15ml）、研钵、漏斗、滴管、滤纸、试管架。 3．试剂：丙酮、CaCO3 三、操作步骤 样品处理及测定：准确称取洗净，擦干（去叶片中脉）的菠菜叶片1.00g，于研钵中加少许CaCO3 研磨成匀浆，用80%丙酮浸提，将上清液过滤（滤纸先用80%丙酮湿润），用滴管吸取80%丙酮分次把研钵中叶绿素浸提液和残渣洗净，然后再用丙酮逐滴把滤纸上的叶绿素溶液洗净，全部转移到具塞刻度试管，定容到15ml，于652nm波长处测定消光值，如需测定叶绿素a和b的含量，可于663nm 和645nm波长处分别测定其消光值，按分式（2）或（3）计算。 四、结果计算 OD652 A＝ ×稀释倍数×100 （1） 34.5×W 式中：A：叶绿素含量（mg/100g）； W: 样品重（g ） Ca——0.0127×OD663－0.00269×OD645（2） Cb——0.0229×OD645－0.00468×OD663（3） Ca，Cb——分别代表叶绿素a和叶绿素b的含量（mg/ml） 五、注意事项 叶绿素是一种极不稳定的化合物，它能被活细胞中的叶绿素酶水解，脱去叶醇基，转变为叶绿酸。光照和高漫都会使叶绿素发生氧化和分解，因此在分离提取叶绿素的过程中，必须注意控制这些因素，尽可能在低温和弱光下进行，并注意缩短实验时间，以防止叶绿素的破坏。

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  虎牙秦柯 2017-10-09 00:00:00

  可以用。 Arnon是传统的叶绿素测定方法，是将材料在80%丙酮溶液中研磨并经过滤或离心除去残渣后，测定提取液的光密度值来计算叶绿素含量，所以是使用分光光度计测量光的吸收值继而估算出色素的含量。二甲基亚砜(DMSO)直接浸提高等植物叶绿素，同样是测定提取液的光密度值来计算叶绿素含量，但步骤较为简省，但是对实验条件的控制要求较严格。呵呵！以下是大体的步骤：叶绿素的分子结构是由四个吡咯环组成的一个卟啉环，此外还有一个叶绿醇的侧键，由于分子具有共轭结构，因此可吸收光能。叶绿素是脂类化合物，所以它可溶于丙酮、石油醚、己烷等有机溶剂，用有机溶剂提取的叶绿素可在一定波长下测定叶绿素溶液的消光值，利用Arnon公式计算叶绿素含量。 二、材料、仪器与试剂 1．材料：菠菜叶片 2．仪器：分光光度计、天平、具塞刻度试管（15ml）、研钵、漏斗、滴管、滤纸、试管架。 3．试剂：丙酮、CaCO3 三、操作步骤 样品处理及测定：准确称取洗净，擦干（去叶片中脉）的菠菜叶片1.00g，于研钵中加少许CaCO3 研磨成匀浆，用80%丙酮浸提，将上清液过滤（滤纸先用80%丙酮湿润），用滴管吸取80%丙酮分次把研钵中叶绿素浸提液和残渣洗净，然后再用丙酮逐滴把滤纸上的叶绿素溶液洗净，全部转移到具塞刻度试管，定容到15ml，于652nm波长处测定消光值，如需测定叶绿素a和b的含量，可于663nm 和645nm波长处分别测定其消光值，按分式（2）或（3）计算。 四、结果计算 OD652 A＝ ×稀释倍数×100 （1） 34.5×W 式中：A：叶绿素含量（mg/100g）； W: 样品重（g ） Ca——0.0127×OD663－0.00269×OD645（2） Cb——0.0229×OD645－0.00468×OD663（3） Ca，Cb——分别代表叶绿素a和叶绿素b的含量（mg/ml） 五、注意事项 叶绿素是一种极不稳定的化合物，它能被活细胞中的叶绿素酶水解，脱去叶醇基，转变为叶绿酸。光照和高漫都会使叶绿素发生氧化和分解，因此在分离提取叶绿素的过程中，必须注意控制这些因素，尽可能在低温和弱光下进行，并注意缩短实验时间，以防止叶绿素的破坏。

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