细菌形态的观察
一、实验目的和内容
目的:巩固油镜的使用;掌握细菌形态观察的基本方法,了解细菌的基本形态。
内容:1.观察细菌的基本形态染色装片。
2.观察枯草芽孢杆菌活菌。
3.观察细菌细胞结构的染色装片。
二、实验材料和用具
溶血链球菌(Streptococcus haemolyticus )、棒杆菌(Corymebacterium)、螺菌(Spirillum)、浮游球衣菌(Sphaerotilus natans)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium )、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis )、普通变形菌(Proteus vulgaris)、丙酮丁醇梭菌(Clostridum acetotylicum)、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum )等细菌的染色装片,枯草芽泡杆菌(Bacillus subis)的斜面菌种。
香柏油、二甲苯、无菌水;
显微镜、擦镜纸、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、吸水纸、小滴管。
三、操作步骤
(一)观察细菌的基本形态
用低倍镜、高倍镜和油镜观察溶血链球菌、棒杆菌、螺菌、浮游球衣菌的染色装片,并分别在油镜下绘图。
(二)观察细菌的细胞结构
用低倍镜、高倍镜和油镜观察巨大芽孢杆菌(示细胞壁)、巨大芽孢杆菌(示异染粒)、苏云金芽孢杆菌(示伴胞晶体)、普通变形菌(示鞭毛)、丙酮丁醇梭菌(示芽孢)、褐球固氮菌(示荚膜)等细菌的染色装片,并分别在油镜下绘图。
(三)观察枯草杆菌活菌,常用压滴法观察。
1.将洁净无油腻的载片放于自己右边前方,在ZY放一小滴无菌水。
2.将酒精灯放于自己正前方,点燃。
3.用无菌操作方法从枯草芽孢杆菌斜面中沾取少量菌体,与载片上的水滴充分混匀,把接种环上残留的菌体杀灭后,放回试管架。
4.用镊子夹一洁净的盖玻片,使其一边先接触菌液,然后将整个盖玻片慢慢放下,注意不要产生气泡。如菌液过多,可用吸水纸适当吸去一部分。
5.先用低倍镜然后转用高倍镜观察,观察时光线要适当调暗些。
四、注意事项
1.注意擦镜头时,只能用擦镜纸。
2,观察完毕,必须将镜筒上升,才能取下装片,放入另一装片后,要按使用油镜要求,重新操作,不能在油镜下直接取下和替换装片,切记!
3.无菌操作过程中,接种环灭菌后不能触及其他物品,挑菌不能过多。
五、实验报告
(一)绘图
l.给出你所观察到的几种细菌的个体形态视野图。
2.给出你所观察到的细菌细胞结构视野图,并注明各部分。
(二)试指出在制备活菌装片时,应注意什么问题?
七、问题和思考
1.用明视野显微镜观察细菌的形态时,你认为用染色装片好,还是用非染色的活体装片好,为什么?观察活体装片与染色装片,光线调节各有什么不同?
2.无菌操作过程中,可否将棉塞放在桌面上?为什么?
3试设计一个准备本实验的工作方案。