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蛋白里有残存的质粒吗?如果有怎样才能知道是什么质粒?谢谢各位大侠!

nunu_nuli 2012-04-15
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碳噫9勺
蛋白里有残存的质粒吗?这个很难明确回答有还是没,要看你的蛋白质是如何提取来的。如果跟质粒提取方法类似就可能会含有。同理会含DNA片段等杂质。
要确认究竟有没有核酸(质粒)物质存在于蛋白质,需采用不同于蛋白质的特异检测方法。已知EB可以插入DNA双链之间发出UV下可见的橘色荧光,你可将你的样品按照核酸检测方法跑个电泳,然后用EB染色,紫外等下看看,若没荧光说明蛋白质是纯的,反之亦然。
怎样才能知道是什么质粒?那就比较麻烦,因为质粒种类实在是太多了,但它肯定来源于你的出发菌株。因此你Z好从你的出发菌株常见质粒去猜测,然后验证其抗性呀、大小呀等等就大概判断了。
4 0 2012-04-23 0条评论 回复
这社会勾心斗角
没有。
10 0 2012-04-16 0条评论 回复
马杰830
你希望有残存的质粒还是不希望有?不希望有的化在纯化蛋白时裂解液中加入DNA酶就可以了。
要验证也很简单,蛋白表达你用的这个质粒信息你应该很清楚啊,你直接取些蛋白样品做下PCR鉴定就可以了。前提是你的表达菌中只有你表达用的质粒,如果还有别的辅助表达质粒或共表达质粒,用相应的引物做PCR鉴定就可以了,PCR的灵敏度还是很高的。
20 0 2012-04-25 0条评论 回复
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