抽提的质粒DNA电泳时怎么出现切口.断裂或降解现象?

(1)使用的是收集后冷冻保藏的细菌。解决方法：使用新鲜培养的细菌。
(2)宿主菌富含核酸内切酶。解决方法：增加一步Rinse A洗涤步骤以彻底去除残留的核酸内切酶。或者将质粒DNA进行乙醇沉淀。
(3)质粒DNA在Solution II中暴露过久，易造成质粒DNA的切口断裂。裂解步骤控制在5分钟内完成。
(4)培养的细菌被杂菌污染。解决方法：重新挑取单菌落培养细菌。
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