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碱裂解法提取质粒过程溶菌酶的作用
对牛弹琴冲淡尚
2012-10-22
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goolring
碱裂解法的裂解液中起主要裂解作用的是NaOH,NaOH可以将细胞膜裂解开,对于革兰氏阴性菌,如大肠杆菌,这类菌,细胞壁很薄,细胞膜裂解后,该菌体就会裂解,所以含有NaOH的裂解液裂解效果明显。
但对于革兰氏阳性菌,如乳酸菌,这类菌细胞壁较厚,NaOH无法进行有效裂解,而溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。当然,对于这种难裂解的细胞,加溶菌酶或煮沸都是一种有效的裂解方法。
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0
2012-10-24
0条评论
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梅眉辣挤诱犊
跟SDS一样,裂解细胞壁释放质粒用的。
不过不加也没什么问题,NaOH与SDS足够将大肠杆菌细胞壁裂解开。
8
0
2012-10-23
0条评论
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