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质粒DNA的提取过程中染色体的去处和原理是什么

937817515zhen 2012-06-17
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xxmdna
首先加入溶液1,:改变细胞膜的通透性。
加入溶液2:使细胞裂解,释放出质粒DNA和染色体DNA,在碱性条件下,破坏碱基配对,使这两种DNA都变性。
加入溶液3:使DNA分子复性。此时,线状染色体DNA的两条链已经全部分开,不会再复合。而质粒DNA,由于处于拓扑缠绕状态而彼此不分开,你可以想象一下,两个环分开之后也是环环相套的情况。所以质粒DNA能够很快的找到自己相对应的那条链,因此在Z适条件下,便可复性。
此时,已经完全分开的线状染色体DNA交联形成不溶于水的线团结构,缠绕附着在细胞壁碎片上,通过离心可去除。
而质粒DNA则留在上清中,通过异丙醇沉淀以及70%乙醇洗涤后便可得到。
1 0 2016-12-02 0条评论 回复
yuan97865
染色体并不是去除的。加solution 2的时候不能剧烈摇晃且时间不能过长就是为了不让菌破裂太厉害而使基因组DNA也释放到溶液中,所以基因组DNA在加溶液三后,离心和细胞碎片一起给沉淀了
18 0 2012-06-18 0条评论 回复
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