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植物DNA提取,分析结果时老师说有降解严重!

linjiaxiu12 2011-03-20
材料是取的新鲜材料,-20冷冻过夜的100V电泳跑了两个小时,胶是1.2%的,会不会与这有关?... 材料是取的新鲜材料,-20冷冻过夜的 100V电泳跑了两个小时,胶是1.2%的,会不会与这有关?
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goolring
不知道你提的这个DNA样品用RNase处理过没有?
如果没有处理过的话,可能你的样品里有大量的RNA存在,显得电泳拖尾,不一定是你的DNA降解严重。另外,电泳图中没有看到明显的DNA条带存在,可能的原因是:1.DNA真的降解了;2.Z后提取出来的DNA溶液里DNA浓度太低。
如果你用RNase处理过了,那么能够说明你的DNA降解的厉害。那Z好使用新鲜的组织,-80度保存的组织也好,不要-20度保存的。
2 0 2011-03-21 0条评论 回复
aaaaaa_gdsz
大片段处没有条带,而小片段处有拖尾
2 0 2011-03-21 0条评论 回复
bkfzuyqv2876
这确实是讲解非常严重的
17 0 2011-03-21 0条评论 回复
xinxmv0119
一般DNA还算比较皮实的,如果你的样品提纯,并且经过RNase处理,跑成这个样子可能是降解了,但是如果蛋白抽提的不干净,还有大量RNA,就会有严重拖尾,可也把你的样品用酚氯仿再抽提一次,经过酒精沉淀,再跑跑看看。
另外看你提的是什么材料,有的材料不好提,需要裂解充分,抽提充分
4 0 2011-03-21 0条评论 回复
醉爱鱼62
从图片来看,四个样品槽的条带都严重拖尾,里面的DNA条带不集中,表明DNA是已经被降解成各种小片段。
DNA十分脆弱,可能照成DNA降解的因素有很多。
罗列几种我能想到的:从植物中提取DNA时没对细胞内的DNA酶进行灭活;过程中被细菌污染;口水等含酶的物质飞入样品;过程中温度、pH剧烈变化。
这个问题要进过多次的讨论,重复的实验才能找到真正的原因。
12 0 2011-03-21 0条评论 回复
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