负染色又称阴性染色,是由Hall发现的相对于普通染色(即正染色)而言的染色技术。其原理在于利用重金属盐包绕低电子密度的样品,增强样本四周的电子密度,造成细微结构之间的"质量-厚度”差异,增强散射吸收反差,钼酸铵负染色液(3%)适用于显示大分子、细菌、病毒、原生动物、噬菌体、细胞器、核酸大分子、蛋白质晶体及其他大分子材料等。染色后的样品图像呈现透明的亮光,而背景图像呈黑色。
操作步骤(仅供参考):
(一)滴染法
1、样品低速离心或采用其他方法浓缩样品,制成悬浮液并且使其达到一定浓度和纯度。
2、将样品悬浮液直接滴于带有支持膜的载网上静置。
3、用滤纸条从液滴边缘吸去多余液体,稍干燥
4、 滴加负染静置。
5、吸去多余染色液,自然干燥,进行显微镜观察。
(二)漂浮法
1、样品低速离心或采用其他方法浓缩样品,制成悬浮液并且使其达到一定浓度和纯度。
2、将带有支持膜的载网置于样品液滴上漂浮以沾取样品。
3、载网置于负染色液上漂浮。
4、吸去多余染色液,自然干燥,进行显微镜观察。