96孔板周围孔细胞死亡，但是中间的孔细胞长的还可以，很奇怪，为什么？

也有可能是因为脱水渗透压改变而造成的死亡。因为板的外围孔较容易蒸发失水。

培养细胞要求板既能透气，又不能被水分迅速蒸发流失。如果板的质量问题造成培养液内水分蒸发掉较多，则培养液会变咸，细胞失水死亡。如果还是用同样的板，可以试试外围不种细胞，每孔加点无菌水，也有助于保护中间孔的细胞。

另外也有可能是楼主加的培养液本身量不够。我都用两到三百微升，楼主如果用比较少，可以试试加多些。

温度

肯定是营养或者温度等生长条件不均匀倒致的