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TritonX-100的作用

333哔哔哔 2010-07-30
TritonX-100是属于中性去污剂,中性去污剂还有聚氧以及十六烷基醚,请介绍一下他们的作用与性质
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go小飞454
Triton X-100是一种非离子型去垢剂

分子式:C14H22O(C2H4O)n

用途:Triton X-100是一种比较温和的去垢剂(表面活性剂或称界面活性剂),常作为添加剂使蛋白保持稳定,尤其是膜蛋白。

性质:
1. Triton X-100对细菌等微生物没有杀伤作用。
2. Triton X-100在紫外波段下有光吸收(lambda max = 275 nm and 283 nm in methanol),因此,当缓冲液中存在Triton X-100时不能通过测定280nm光吸收来进行蛋白定量。
3. Triton X-100常与CHAPS等zwitterionic 去垢剂一起使用来纯化膜蛋白,使膜蛋白保持其天然构象。
4.Triton X-100可以提高真核细胞细胞膜的通透性,因此在Immunostaining时常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100的PBS或TBS。
5. Triton X-100非常稳定,密封避光 +2 to +8℃条件下可以长期保存。
6.Triton X-100是透明,略显粘稠,稍微发黄的液体。
7. Triton X-100的密度为1.07 g/ml,pH6.0-8.0(5%的溶液)。
8. Triton X-100可以高压灭菌。
9. 用Triton X-100来裂解细胞时,0.1% Triton X-100就足够了,不过,达到0.5%时也没问题。
10. 蛋白酶K在含1% Triton X-100的溶液中依然保持活性。
11. 可以使用Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161 cartridges 来去除Triton X-100 。

去垢剂(又称表面活性剂)是一类即具有亲水基又具有疏水基的物质,一般具有乳化、分散、和增溶作用,可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多种类型,中性去垢剂在蛋白提取中应用的较多。

中性去垢剂又称非离子表面活性剂,对蛋白质的变性作用影响较少,宜于蛋白质或酶提取之用。一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类,如PEG200;多元醇类表面活性剂,如山梨醇、司盘类和吐温类;聚氧乙烯脂肪醇醚,如苄泽类、平平加类;聚氧乙烯烷基苯酚醚,如Igepal CO、乳化剂OP、Triton、Pluronic(用作消泡剂、润湿剂、增溶剂)、泡敌。中性去垢剂作用后可通过Sephadex LH-50柱除去;也可直接上DEAE-Sephadex柱层析分离目的蛋白,不必先除去去垢剂。
11 0 2016-12-01 0条评论 回复
__渐忘ち
在细胞骨架的观察实验中,采用去垢剂TritonX-100 的缓冲液处理植物材料时,可将细胞的膜结构和大部分蛋白质抽提掉,但细胞骨架系统的蛋白却被保存下来,后者用考马斯亮蓝R250 染色,在光学显微镜下可见一种网状结构。

Triton X-100是常用的非离子性表面活性剂,其是棕色油状液体,能溶于冷水,并有强烈的起泡性能。是优良的洗涤剂。农药加工中常用作杀虫剂、杀菌剂、除草剂等乳剂中的乳化剂。 免疫细胞化学中,Triton X-100常用浓度为1%和0.3%,但通常是先配制成30%的Triton X-100储备液,临用时稀释至所需浓度。它能溶解脂质,以增加抗体对细胞膜的通透性。1%的Triton X-100常用于漂洗组织标本,0.3%的Triton X-100则常用于稀释血清,配制BSA等。
16 0 2010-07-31 0条评论 回复
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