传代细胞的培养步骤

传代细胞的培养步骤如下：
(1)人无菌室之前用肥皂洗手，用75％酒精擦拭消毒双手；
(2)细胞传代前先在倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数观察；
(3)打开超净工作台的紫外灯照射台面30 min左右，关闭超净工作台的紫外灯，打开抽风机清洁空气，除去臭氧；
(4)超净工作台面应整洁，用75％酒精溶液擦净；
(5)贴壁细胞的传代；
(6)半悬浮细胞及悬浮细胞培养的传代。

适应在体外培养条件下持续传代培养的细胞称为传代细胞。幼年动物的肾、肺、肝、卵巢、上皮、肌肉与肿瘤等组织的细胞较易培养，而神经细胞则较难培养。原代细胞基础上通过胰酶等物质消化后继续用于细胞培养的细胞，它与原代细胞具有相同核型。这类细胞在体外可以无限制分裂。