1.1 固体和半固体样品:称取10 g 样品至盛有90 mL 灭菌生理盐水的锥形瓶中,充分振摇,即为1:10。(可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)
1.2 液体样品:以无菌吸管吸取10 mL 样品至盛有90mL 生理盐水的锥形瓶(可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10 的样品匀液。
1.3 取1 mL 1:10 稀释液注入含有9 mL 无菌水的试管中, 另换一支1 mL 无菌吸管反复吹吸,此液为1:100 稀释液。
1.4 按1.3 操作程序,制备10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1 次1 mL 无菌吸管。
1.5 根据对样品污染状况的估计,选择2 个~3 个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10 倍递增稀释的同时,每个稀释度分别吸取1 mL 样品匀液于2 个无菌平皿内。同时分别取1 mL 样品稀释液加入2 个无菌平皿作空白对照。
1.6 及时将15 mL~20 mL 冷却至46 ℃的霉菌培养基倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。