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请教高手:如何制作萨氏培养基(请详细写明过程)?谢谢

人参娃娃66 2005-11-06 13:44:01 365  浏览
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  • rknh010 2005-11-07 00:00:00
    依据微生物生长繁殖的需要配制的营养物质,用于分离、培养、保藏及产品制作。其成分因微生物的种类而异,一般均含有碳素营养(碳源)、氮素营养(氮源)、矿质营养和水,并根据不同微生物的需要,将其酸碱度(pH)调至一定范围。按所用原料不同,可分为:天然培养基、半合成培养基、合成培养基。按照培养基的物理性质又可分为:液体培养基(营养的物质溶于水中制成);固体培养基(天然固体原料加适量的水,或是液体培养基中加入1.5%~2%的琼脂作为凝固剂)等。 萨氏(Sabouraud)培养基:蛋白胨10g,葡萄糖10g,琼脂15g,水1000ml。 灭菌法: (1)干热灭菌:一般玻璃用具,如培养皿、吸管等用报纸包好后,放烘箱中,使温度逐渐升至150~160℃,保持2小时后,关闭电源,使缓慢冷却(降温太快时玻璃易碎),即灭菌完毕。 (2)湿热灭菌:利用蒸气杀菌。 ①常压法(间歇灭菌法):是用蒸汽锅(或普通锅)蒸,温度不超过100℃。在没有高压灭菌设备或在高温灭菌设备或在高温灭菌易破坏的培养基情况时用此法。每次一小时,共三次,因为diyi次蒸后,其中营养细胞被杀死,而孢子还保持着活力,所以蒸后,将培养基放入温箱中24小时,待其孢子萌发,再蒸第二次。同样再经24小时,蒸第三次,这样才算灭菌完善。 ②高压法:锅内增加压力时则温度随之。 压力0.56kg/cm2=8磅/英寸2时,温度为112.6℃;灭菌30分钟。 压力1kg/cm2=15磅/英寸2时,温度为120~121℃;120℃,灭菌20分钟。 (3)火焰灭菌:对于接种针或其它金属用具灭菌,可直接在酒精灯火焰上烧至红热。此外在接种过程中,试管或三角瓶口,也采取通过火焰达到灭菌的目的。见图3-5。 (4)药物灭菌: ①70%的酒精:冷却烧红后的接种针,操作前手或器皿的表面杀菌,载玻片,盖玻片的浸泡等。 ②0.1%液:用于材料表面杀菌,以及对用具或实验后废弃的培养物的处理。 ③(40%甲醛液):用于空间熏蒸灭菌,加热或加高锰酸钾使其放出甲醛气体。注意将空间密闭并维持24小时。 (5)紫外线灭菌:用于接种室等空气灭菌。

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