你是说DNA 的提取方法么?现在正在做这方面试验,希望能帮得上你
1) 研磨:取样少许置入1.5ml离心管中,以移液枪加入消化缓冲液600μl,冲入液氮或少许石英砂研磨至澄清。
2) 水浴:水浴温度55℃,水浴时间3-5h左右
3) 酚抽提:每支离心管中加入600μl Tris饱和酚,轻柔的摇晃使固液混合充分。离心机4℃,8000r/min离心10min,以移液枪小心的将上清液取出至新管,重复步骤一次
4) Cl抽提:向抽提出的上清液中加入等体积的Cl液,轻柔的摇晃使充分混匀,高速冷冻离心机4℃,10000r/min离心10min,以液枪小心的将上清液取出。
5) DNA沉淀:向抽提的上清液中加入2倍体积的无水乙醇,并轻柔的摇晃使溶液充分,再置于-20℃冰箱中保存10min后高速冷冻离心机4℃,12000r/min离心5min,小心倾去乙醇,可见DNA沉淀物。
6) DNA 洗涤:向在留有DNA沉淀物的离心管中加入-20℃冰箱中保存的70%乙醇500μl,后离心机4℃,12000r/min离心5min,小心倾去乙醇后可见离心管底白色小圆片状的DNA提取物。将离心管倒置于无菌室内室温至干燥。
7) DNA溶解:向干燥好的DNA提取物中加入30μl去离子水,4℃冰箱保存