全部评论(2条)
-
- 姐姐是魔鬼 2013-02-28 00:00:00
- 1.模板DNA的变性 模板DNA就是浴安复制的DNA片段,模板DNA加热至93℃左右一定时间后,连接碱基的氢键在高温厂断裂,使DNA双链或纤PcR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单镕,并成为下步扩增反应的模板。 2.模扳DNA与引物的退火(复性) 引物是一小段人工合成的20一30个碱基单链DNA或RNA,也是聚合酶链式反(PcR)‘[IA工合成的复制起始点,每一条引物都与持扩增的靶区域是特异互补。PCR反应体系中需加入 对。 股在55℃左右,引物就会勺模板DNA单链肋力:补序列配对结。 3.引物的延伸 DNA模板与引物结合物在Tq DNA聚合酶的作均下,以侧为反应原料,靶序列为模板,技碱苯配对原理,合成一条新的州A互补链。新合成的DNA链并不是整个DNA链,而是由引物界定的、生物体特异的loo一枷个碱基对的靶序列。 TN DNA聚合酶是种来源于嗜热水生卤的重组的热稳定的DNA聚合两、聚合酶所不同的是在高温状态仍具有活性。 4.DNA扩增 重复以卜变性、退火、延伸=个过程,就可状得更多的洲A链,这—过程巾新合成的新链又可成为下次循环的模板,使产物的数量按24方式增长。从形论上讲,经过25—30个循环后DNA可扩增ld一10’倍。
-
赞(3)
回复(0)
-
- yuzmzz 2017-11-25 02:34:43
- PCR仪肯定会自带说明书的,而且要根据你目的片段的长度,引物的TM来设定延伸时间和退火温度 一般来说 PCR由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至90~95℃一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55~60℃,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在DNA聚合酶的作用下,于70~75℃,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
-
赞(2)
回复(0)
热门问答
- PCR仪的使用方法
- 电导仪的使用方法
- 微波萃取仪的使用方法
- 凯氏定氮仪使用方法?
- 乐仪洗鼻器的使用方法
- 全自动凯氏定氮仪的使用方法?
- 现在要做牧草的粗蛋白,现有KDN—08(A)型定氮仪,试验中接通自来水后,电流没显示,除了水不符合,外还有没有其他的因素? 很急很急……
- 质构仪使用方法
- 我想请教各位大神,美国博勒飞BrookfieldLFRA质构仪使用方法有谁知道?继续,Z好是文本格式的,什么word,pdf,ppt都行。在此谢过!!!... 我想请教各位大神,美国博勒飞BrookfieldLFRA质构仪使用方法有谁知道?继续,Z好是文本格式的,什么word,pdf,ppt都行。在此谢过!!! 展开
- 便携式农药残留仪使用方法
使用方法
1、开机。按住面板上的【开/关】键约3s,仪器开机(开机后,再次按此键可关机);按【模式】键切换至“温度”,当温度达到40℃时,仪器发出一声提示音,预热完成,可以开始测试。
2、装片。将速测卡撕去盖膜对折后再展开,插入压纸条下的各通道加热板上(注意红色药片一端在上方,白色药片一端在下方),检查速测卡放置位置是否正确,速测卡中间的虚线应与压条对齐,不要歪斜。
3、取样。选择有代表性的蔬菜或瓜果皮,擦去表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取5g放入带盖瓶中,加入10mL纯净水或缓冲溶液,震荡50次(有条件用户可配备超声波清洗器搅拌),静置2min以上。每批Z好做11个检样,同时做一个纯净水或缓冲液的空白对照。每剪完一个样品,剪刀要洗净后方可处理另一个样品,以免交叉污染。用移液枪取80μL样品液加到白色药片上。
如果检测是在采样现场或条件简陋的情况下进行,可直接在待检蔬菜叶尖部位滴2~3滴洗脱液,用另一片菜叶尖部在滴液处轻轻摩擦,使蔬菜表面的残留农药充分溶入洗脱液中。然后滴一滴在白色药片上。
4、测试。按【启动】键,反应10min(“反应”指示符亮)。当听到仪器发出急促蜂鸣提示音时关闭上盖,显色开始3min(“显色”指示符亮);待仪器发出缓和的蜂鸣提示音时,打开仪器上盖,进行结果判定。
- PCR仪如何设置
- PCR仪工作原理?
- 如标题所述
- 激光投线仪的使用方法
- 想做集成吊顶,买了个激光投线仪(5线的)来看基准线。可用的时候,水平线只到机器摆放的位置那个高度,我想问下,谁能告诉我能不能有什么调节方法,可以把水平线调节高低?... 想做集成吊顶,买了个激光投线仪(5线的)来看基准线。可用的时候,水平线只到机器摆放的位置那个高度,我想问下,谁能告诉我能不能有什么调节方法,可以把水平线调节高低? 展开
- abi7500荧光pcr仪用什么pcr管
- 超平仪如何使用方法?
- 激光投线仪使用方法
- 希望高手帮帮我!感激不尽!... 希望高手帮帮我!感激不尽! 展开
- 投线仪使用方法是什么?
- 投线仪使用方法是什么?... 投线仪使用方法是什么? 展开
- 凝点倾点测定仪使用方法
1、打开电源开关,温控表显示浴槽温度,打开搅拌开关,浴槽搅拌开始工作,打开制冷开关,制冷机组工作。
2、根据测试项目的需要使浴槽温度点设定到需要的数值温度设定:在测量工作状态下直接增加键或减少键修改温度给定值,长按增加键或减少键可快速滚动增减数值。
启动自整定:长按>键,直到SV窗口交替显示AT提示符与设定温度值,这时仪表进入自整定状态;使系统进行两次超调来计算出Z佳PID参数后自动进行高精度恒温控制。
中止自整定:自整定过程中,长按>键,直到SV窗口不再交替显示AT提示符与设定温度值时整定过程中止,远PID参数不变。(温控表操作可以参阅温控表说明书),仪器出厂前自整定已调好,用户可以不用调整。
温控表自动恒定在设定的温度点上(详细请参阅温控表说明书)
3、凝点测试方法
- PCR仪的获得诺贝尔奖的PCR技术
2月突出贡献榜
推荐主页
最新话题
参与评论
登录后参与评论