GX液相色谱法（HPLC）测茶叶中有效成分的含量

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  狂爱佐 2013-11-25 00:00:00

  GX液相色谱法是以液体作为流动相，借助于高压输液泵获得相对较高流速的液流以提高分离速度、并采用颗粒极细的GX固定相制成的色谱柱进行分离和分析的一种色谱方法。 在GX液相色谱中，若采用非极性固定相，如十八烷基键合相，极性流动相，即构成反相色谱分离系统。反之，则称为正相色谱分离系统。反相色谱系统所使用的流动相成本较低，应用也更为广泛。 ZG是茶的故乡，制茶、饮茶已有几千年历史，名品荟萃，主要品种有绿茶、红茶、乌龙茶、花茶、白茶、黄茶。茶有健身、治疾之药物LX，又富欣赏情趣，可陶冶情操。 茶叶的营养价值和药理作用是与它的化学成分分不开的。它的化学组成约有四百多种，其中对人体营养价值与药理作用关系比较密切的是多酚类、生物碱和维生素。 茶多酚类物质是茶叶主要的呈味物质，苦味。茶叶中含量比较高，总量占干茶物质的18％～36％，是茶叶YY价值的Z主要的物质基础，具有降血脂、抗肿瘤、抗脂质过氧化、KJ和抗病毒、调节免疫功能等功效。茶多酚实际上是多种多酚类化合物的总称，其中Z重要的是儿茶素类化合物，它占茶多酚总量的50％～70％。 茶叶指纹图谱是利用茶内含物质的秘密、茶树遗传的密码、用图谱的方式来表述具有不同特性的茶叶，可包含种类、产区、树龄、特性、制成品的年份等。本实验用HPLC对茶叶的主要成分进行分离，是建立茶叶指纹图谱的基础。 实验过程中有可能会带入一些杂质，因此实验结束后必须清洗柱子。 三、仪器与试剂 1. 仪器： Agilent1100 GX液相色谱仪， 50ul微量注射器。 2. 试剂： （1）甲醇 色谱纯。 （2）乙腈 色谱纯。 （3）甲酸 分析纯。 四、实验步骤 1、色谱条件 色谱柱：色谱柱：XB-Phenyl ，5μm，4.6x150mm 柱温：室温 流动相：乙腈 1%甲酸 /% 检测器：DAD。 检测波长：276nm 进样体积：20??l定量环，实际注射每次可控制在50??l。 梯度洗脱： 2、待测溶液的配制 取两种不同的绿茶，分别标记为绿茶1、绿茶2。各取约0.8000g，用50ml沸水冲泡，分别在10min、30min取上清液，过0.45μm滤头，即得样品1（绿茶1冲泡10min）、样品2（绿茶1冲泡30min）、样品3（绿茶2冲泡10min）、样品4（绿茶2冲泡30min）。 4、色谱测定 (1) 按操作规程开启电脑，开启脱气机、泵、检测器等的电源，启动Agilent 1100在线工作软件，设定操作条件。流量为1.00ml/min。 (2) 待仪器稳定后，开始进样。将进样阀柄置于“LOAD”位置，用微量注射器吸取混合物溶液50ul，注入仪器进样口，顺时针方向扳动进样阀至“INJECT”位置，此时显示屏显示进样标志。 (3) 记下各组分色谱峰的保留时间及峰面积。并将测试报告打印成htm式，以便直接贴到实验报告中。 (4) 实验完毕，清洗系统及色谱柱。

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