有哪些实验用于检测中性粒细胞功能

　　一、细胞运动功能的检测
　　中性粒细胞的运动有随意运动和定向运动之分，可根据其细胞面积判 断中性粒细胞活动的强度。严重酒精中毒及某些肿瘤患者，其中性粒细胞 的随意运动明显减弱，甚至消失。中性粒细胞的定向运动表现为趋化运动， 测定方法大同小异，原理相同。
　　(一)体内试验法(皮肤窗法)
　　染色观察中性粒细胞聚集的开始时间、程度和形态变化。健康人白细 胞在皮窗处 2～3 h 开始聚集，细胞数达 50～100 个，6 小时可达 1 000 个 以上。初期以中性粒细胞为主，以后单核细胞逐渐增多。
　　(二)体外试验法
　　1．滤膜小室法(Boyden 小室法)
　　用油镜检测细胞在透明滤膜内通过的距离，求其趋化单位。
　　2．琼脂糖凝胶平板法
　　将琼脂糖制成凝胶平板，在ZY孔加中性粒细胞悬液，两侧孔分别加 趋化因子或对照培养液。经 37℃温育 2～3 小时后，染色测量细胞运动的距 离，按下式计算移动指数。
　　移动指数=趋化移动距离/随意移动距离

　　二、吞噬和杀菌功能的检测
　　(一)细胞内杀菌功能的检测
　　将待检细胞悬液按一定比例混和，加活的白色念珠菌悬液，保温后加 美蓝溶液作活体染色，取样涂片镜检。如胞内白色念珠菌呈蓝色，表示已 被杀死。共计数 100～200 个细胞，按下式分别求其吞噬率和杀菌率。
　　吞噬率(％)=（吞噬细菌的细胞数/计数的细胞数）×100％
　　杀菌率(％)=（胞内含着染菌体的细胞数/计数的细胞数）×100％
　　溶细胞法能更直接反映细胞杀菌情况。将待检中性粒细胞悬液与已经 新鲜人血清调理过的细菌(大肠杆菌或金黄色葡萄球菌)悬液按一定比例混 合，置 37℃，每隔一定时间取定量培养物，经稀释后接种固体平板培养基， 37℃培养 18 小时后，计算菌落数，按下式计算中性粒细胞的杀菌能力。
　　杀菌率(％)=(1—（30、60、90min 的菌落数/0min 菌落数)×100％
　　正常情况下，吞噬指数接近于 1，吞噬率 61％～64％。对大肠杆菌的 杀菌率大于 90％，对金黄色葡萄球菌的杀菌率大于 85％。
　　(二)硝基四氮唑蓝(NBT)还原试验
　　本法用以检测中性粒细胞的胞内杀菌能力。由于细胞在杀菌过程中耗 能剧增，其耗氧量亦随之相应增加，细胞内磷酸己糖旁路代谢活力增强， 葡萄糖 6-磷酸酶氧化脱氢。此时加入 NBT 可接受所脱的氢，使原呈淡黄色 的 NBT 还原成点状或块状颗粒，并沉积于胞浆内。在显微镜下计数细胞内 有蓝色甲膳颗粒的中性粒细胞所占比例。正常参考值为 5％～10％。
　　(三)化学发光测定法
　　中性粒细胞在吞噬经调理的金黄色葡萄球菌过程中，出现呼吸爆发， 产生大量活性氧自由基（oxygen redicals)，它们与细胞内杀菌作用密切 相关，同时又能产生微弱的发光现象。在反应体系中加_米诺能起增应， 使发光效率大为增强，可用化学发光仪测定。