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细菌涂片怎么制作?

小扣子316 2013-01-28
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孙思远孙思思
1、涂片的制作有一定要求,即涂片不能太厚,细菌在涂片中应呈单层分布。2、为了观察细菌的典型形态,应取处于对数生长期的细菌进行涂片。

步骤及注意事项:
1.涂片:取清洁无油玻片一块,置火焰上通过数次,用烧灼并冷却了的接种环取菌液1~2环,均匀涂布于载玻片ZY(直径1~1.5 cm)。
玻片无菌,接种环烧灼并冷却后使用,涂布应均匀。

2.干燥:涂片放室温自然干燥;也可将标本面向上,在离火焰约15 cm高处微微加热烘干,切勿靠近火焰;或用电吹风吹干。

3.固定:常用加热固定法,其主要目的之一是使菌体较牢固粘附于载玻片,防止其在染色时被染液和水冲掉,其二是杀死细菌;其三是使菌体蛋白质变性凝固,从而使细菌形态固定。其四是可改变菌体对染料的通透性,从而使细菌易于着色。固定的方法是手执载玻片一端,标本面向上,在火焰外焰上水平地以钟摆速度来回通过3次,注意温度不宜太高,以玻片反面触及手背部皮肤感觉热而不烫为宜。

注:

若取菌落涂片,则需先用接种环取0.9% 氯化纳(NaCl)1~2环置载玻片上,再用烧灼且已冷却的接种环取菌落少许放在0.9% NaCl内研磨均匀,涂成直径约1~1.5 cm的菌膜。接种环经火焰灭菌后方可放回原处。其它步骤同上2,3
1 0 2017-10-15 0条评论 回复
werefcd
1.采集从富含有机质的小便池采集浮在液面部分的膜和液体,用双层白色绸布过滤。将滤液镜检,若细菌三型比例适当,即可采用。2.固定在90毫升滤液中,加入10毫升甲醛液。摇匀,固定8小时以上。3.水洗固定后的材料采用离心沉淀法,用蒸馏水换掉固定液,即得到细菌三型原液。离心沉淀时间每次5分钟,共四次。4.涂片先将学生用文字墨汁用数层滤纸过滤,再将细菌三型原液与适量的墨汁滤液混合均匀。然后将混合液均匀涂布于洁净的载玻片上。在30℃左右的恒温箱中烘干。5.封盖将镜检玻片上材料三型齐全,而且分布均匀,背景清洁的部分,即用中性树胶封盖。制好后的涂片细菌呈白色,底色为黑色。
3 0 2013-01-29 0条评论 回复
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