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乙醇沉淀法怎样纯化PCR产物啊?谢谢!

linjiaxiu12 2010-01-16 04:01:29 573  浏览
  • 乙醇沉淀法怎样纯化PCR产物啊?谢谢! 我的PCR以及酶切产物都需要纯化,用柱子纯化后总会失去一些小片段,所以有谁用过乙醇沉淀法的,麻烦给介绍一下具体的步骤啊,谢谢了! 谢谢,其他好的方法也可以,急求中,谢谢大家了!

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全部评论(2条)

  • wangpeiaili100 2010-01-17 00:00:00
    乙醇沉淀的过程: 加入等体积的冷乙醇,加入1/10体积的NaAC(3M,pH5.2)后上下颠倒混匀, -20度30分钟,12000转4℃离心10分钟。倒掉上清,加入70%的冷乙醇,轻轻混匀,12000转4℃离心10分钟;倒掉上清,放在室温中干燥,标准是闻不到乙醇的味道,切记不要干燥过头。加入适当体积水或者TE缓冲液溶解。

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  • a520131400701 2010-01-18 00:00:00
    一般的纯化方法似乎都会造成小片段的丢失,我可以给你的建议有两个:1 试一下小片段的胶回收试剂盒;2 试一下测序反应后的纯化方法(这个如果你有需要直接HI我)。 酶切产物下游你要做什么啊,为啥非要纯化呢~还有你所说的小片段有多小啊~小于100bp不?

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