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Xeno-Free人间充质干细胞培养基 埃泽思生物AC-1001003

上海埃泽思生物科技有限公司

企业性质生产商

入驻年限第7年

营业执照已审核
同类产品间充质干细胞(17件)

Xeno-Free 人间充质干细胞培养基

产品基本信息

产品名称Applied Cell ® Xeno-Free 人间充质干细胞培养基
货 号AC-1001003
规 格基础培养基 450mL,添加剂 50mL
运输保存条件基础培养基 2-8℃,添加剂-20℃至-80℃;混合后 2-8℃
使用范围人类骨.髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞原代分离、扩增与传代培养
保质期12 个月


产品简介

Xeno-Free 人间充质干细胞培养基是埃泽思生物(Applied Cell®)自主研发的一款无外源动物成分的人间充质干细胞培养基。可应用于人骨.髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养,并保持其多向分化潜能。本产品内毒素水平远低于中国药典标准,生产过程遵循 ISO9001 体系,并符合 GMP 指导原则。

Xeno-Free 人间充质干细胞培养基主要成分:氨基酸,维生素、无机盐、白蛋白,转铁蛋白、胰岛素、微量元素,细胞因子等。

产品特性

 无外源动物蛋白成分,大大降低各类病毒、霉菌和支原体等的污染风险。

 全程无血清生产,极大降低批次间差异。

 可用于原代分离,且培养过程无需包被培养板。

 扩增效率高,24h 左右增殖翻倍,节省培养时间。

 内毒素<0.06EU/ml,远低于中国药典水平

产品内容


组分

规格

数量

运输

Human Mesenchymal Stem Cell Basal Medium

人间充质干细胞基础培养基

450mL

1瓶

冰袋

Human Mesenchymal Stem Cell Supplement

人间充质干细胞添加剂

50mL

1瓶

干冰


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细胞消化液(Applied Cell®: Cat. no. AC-1001024)


实验准备

人间充质干细胞培养基配制

1.1. 37℃快速解冻人间充质干细胞添加剂,快速溶解时不易破坏添加剂中营养物质,时间大致为10min。

待添加剂融化后摇匀,分装或直接按比例添加到基础培养基中,分装后添加剂立即储存于-20℃至-80℃,避免反复冻融 。

1.2. 将添加剂以 10%比例加入到人间充质干细胞基础培养基中,混匀,即为人间充质干细胞培养基(AC-1001003)。

混合后培养基可在 2-8℃ 稳定储存 2-3 周,不建议使用已配制超过 3 周的培养基。

1.3. 人间充质干细胞培养基可直接应用于人类骨.髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养


操作方法(以下步骤皆应在无菌条件下操作)

hMSC细胞复苏(10cm dish)

1.1. 从液氮中取出冻存的 hMSC 细胞,迅速将冻存管放入 37℃水浴快速融解。

1.2. 在生物安全柜或超净台中,将解冻后的细胞悬液缓慢加入 5 mL 预温的人间充质干细胞培养基(AC-1001003)。

1.3. 1200rpm 离心 3 min,吸掉上清,加入 10ml 人间充质干细胞培养基重悬细胞。

1.4. 将细胞均匀铺到培养皿中,水平十字振动培养皿使细胞均匀分布,5% CO2的 37℃恒温细胞培养箱中培养 24 小时后观察细胞状态。

1.5. 24h 后更换新鲜人间充质干细胞培养基继续培养,每 2-3 天更换培养液。

hMSC细胞传代培养

2.1. 在显微镜下观察细胞,当细胞融合度达到 90%,即可传代。

2.2. 在超净台/安全柜中,吸掉原有培养基,加入 PBS 溶液清洗一次,加入细胞消化液(AC-1001024)

使之完全覆盖皿/瓶底。

2.3. 室温孵育 4-5 分钟或 37℃孵育 2-4 分钟,显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。

2.4. 加入消化液 2 倍体积的人间充质干细胞培养基,用移液器轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞,并轻轻吹打混匀,

使细胞完全分散。

2.5. 将细胞悬液转移到 15 mL 离心管中,1200 rpm 离心 3 min。

2.6. 弃上清,加入人间充质干细胞培养基,重悬细胞,计数。1:3-1:4 比例传代,或按 1-2x104cells/cm2 传代,

均匀铺在培养皿/瓶中,置于 37℃,5%CO2 培养箱中培养。

注意:细胞传代所需的时间:2-4 天。5 代及之前的细胞,生长速度较快。5 代以后的细胞,生长速度稍缓。


hMSC细胞冻存

3.1. 细胞达到 90%汇合度, 吸掉原有培养基,PBS 清洗一次。

3.2. 加入细胞消化液(AC-1001024)使之完全覆盖皿/瓶底,室温孵育 4-5min 或 37℃孵育 2-4min

分钟,显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。

3.3. 加入消化液 2 倍体积的人间充质干细胞培养基,用移液枪轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞,并

轻轻吹打混匀,使细胞完全分散。

3.4. 将细胞悬液转移到 15 mL 离心管中,1200 rpm 离心 3 min,吸掉上清。

3.5. 加入适量无血清细胞冻存液(治.疗级)(AC-1001006),调整细胞冻存密度在 1×106 cells/mL

3.6. 左右,每支冻存管分装 1.5-2ml。

3.7. 直接放入-80℃,24h 后转入液氮中长期保存。

细胞形态图

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质量控制

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