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入驻年限第7年
人间充质干细胞成骨分化试剂盒
产品基本信息
产品简介
人间充质干细胞成骨分化试剂盒是埃泽思生物(Applied Cell®)自主研发的一款用于人间充质干细
胞诱导成骨分化的产品,可用于骨.髓、脐带、脂肪等组织来源的间充质干细胞的诱导成骨分化
产品特性
诱导分化程序简单便捷。
诱导成骨细胞效率高。
产品内容
相关材料
• Xeno-Free 人间充质干细胞培养基(Applied Cell®:AC-1001003)
• 人间充质干细胞成骨分化试剂盒(Applied Cell®:AC-1001027)
• 成骨检测染液(Applied Cell®:AC-1001021)
• 细胞消化液(Applied Cell®:AC-1001024)
• 磷酸盐缓冲液(1×) (Applied Cell®: Cat.AC-1001037)
实验准备
人间充质干细胞成骨分化培养基配制:
1. 2-8℃解冻人间充质干细胞成骨分化添加剂,轻晃摇匀;
2. 随后将添加剂加入到人间充质干细胞成骨分化基础培养基中(添加剂 10mL 与 90mL 基础培养基彻底
混合)混匀,即为人间充质干细胞成骨分化培养基。人间充质干细胞成骨分化培养基可在 2-8℃稳定储存 2-3 周。
注意:人间充质干细胞成骨分化添加剂只能在 2-8℃解冻,待添加剂加入到培养基以后,请用培养基
润洗添加剂试管 1-2 次,因添加剂量较少可防止添加剂粘附在试管壁上造成损失。
实验操作
1. 诱导成骨(以 6 孔板为例)
1.1. 使用细胞细胞包被液包被细胞培养板,将传代或复苏冻存的人间充质干细胞接种到 6 孔板上,密度为 2×105 -3×105 cells/cm2 或 2×105 -3×105 cells/孔,置于 37℃,5% CO2 培养箱中培养,当细胞汇合度达到 80%-90%时,小心的将孔内人间充质干细胞培养基吸掉,向 6 孔板中加入 2 mL 人间充质干细胞成骨分化培养基,以此记为第 0 天;
注意:成骨分化容易使细胞卷起,,成骨分化时应使用包被液包被细胞培养板。
1.2. 每隔 1-2 天更换新鲜的人间充质干细胞成骨分化培养基;
注意:为防止成骨细胞脱落,建议成骨过程中出现大量钙结节之后,换液形式变为每天一次半量换液。
1.3. 诱导 14-21 天期间,视细胞的形态变化及生长情况(如图 1 所示),可用成骨检测染液(AppliedCell:AC-1001021)
进行染色。
成骨检测染液染色
2.1. 诱导成骨分化结束后,吸掉 6 孔板中的成骨分化培养基,用 PBS 冲洗 1-2 次。每孔加入 1 mL细胞固定液,
固定 10~30 min;
2.2. 吸掉细胞固定液,PBS 冲洗 2 次。每孔加入 2 mL 成骨检测染液,染色 3-5 min;
2.3. 吸掉成骨检测染液,用 PBS 冲洗 2-3 次;
2.4. 将培养板置于显微镜下观察成骨染色效果(如图 2 所示)。