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人间充质干细胞成骨分化试剂盒

上海埃泽思生物科技有限公司

企业性质生产商

入驻年限第7年

营业执照已审核
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人间充质干细胞成骨分化试剂盒

产品基本信息

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产品简介


人间充质干细胞成骨分化试剂盒是埃泽思生物(Applied Cell®)自主研发的一款用于人间充质干细

胞诱导成骨分化的产品,可用于骨.髓、脐带、脂肪等组织来源的间充质干细胞的诱导成骨分化

产品特性

 诱导分化程序简单便捷。

 诱导成骨细胞效率高。

产品内容


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相关材料

• Xeno-Free 人间充质干细胞培养基(Applied Cell®:AC-1001003)

• 人间充质干细胞成骨分化试剂盒(Applied Cell®:AC-1001027)

• 成骨检测染液(Applied Cell®:AC-1001021)

• 细胞消化液(Applied Cell®:AC-1001024)

• 磷酸盐缓冲液(1×) (Applied Cell®: Cat.AC-1001037)

实验准备

人间充质干细胞成骨分化培养基配制:


1. 2-8℃解冻人间充质干细胞成骨分化添加剂,轻晃摇匀;

2. 随后将添加剂加入到人间充质干细胞成骨分化基础培养基中(添加剂 10mL 与 90mL 基础培养基彻底

混合)混匀,即为人间充质干细胞成骨分化培养基。人间充质干细胞成骨分化培养基可在 2-8℃稳定储存 2-3 周。

注意:人间充质干细胞成骨分化添加剂只能在 2-8℃解冻,待添加剂加入到培养基以后,请用培养基

润洗添加剂试管 1-2 次,因添加剂量较少可防止添加剂粘附在试管壁上造成损失。

实验操作

1. 诱导成骨(以 6 孔板为例)

1.1. 使用细胞细胞包被液包被细胞培养板,将传代或复苏冻存的人间充质干细胞接种到 6 孔板上,密度为 2×105 -3×105 cells/cm2 或 2×105 -3×105 cells/孔,置于 37℃,5% CO2 培养箱中培养,当细胞汇合度达到 80%-90%时,小心的将孔内人间充质干细胞培养基吸掉,向 6 孔板中加入 2 mL 人间充质干细胞成骨分化培养基,以此记为第 0 天;

注意:成骨分化容易使细胞卷起,,成骨分化时应使用包被液包被细胞培养板。

1.2. 每隔 1-2 天更换新鲜的人间充质干细胞成骨分化培养基;

注意:为防止成骨细胞脱落,建议成骨过程中出现大量钙结节之后,换液形式变为每天一次半量换液。

1.3. 诱导 14-21 天期间,视细胞的形态变化及生长情况(如图 1 所示),可用成骨检测染液(AppliedCell:AC-1001021)

进行染色。

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成骨检测染液染色

2.1. 诱导成骨分化结束后,吸掉 6 孔板中的成骨分化培养基,用 PBS 冲洗 1-2 次。每孔加入 1 mL细胞固定液,

固定 10~30 min;

2.2. 吸掉细胞固定液,PBS 冲洗 2 次。每孔加入 2 mL 成骨检测染液,染色 3-5 min;

2.3. 吸掉成骨检测染液,用 PBS 冲洗 2-3 次;

2.4. 将培养板置于显微镜下观察成骨染色效果(如图 2 所示)。

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